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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物化学 » 【求助】求助：液相，流动相问题？
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skymahaol

[交流] 【求助】求助：液相，流动相问题？ 已有2人参与

WATERS HPLC不知道出现了什么问题，峰面积重现性很不好。

　　用了两个样品，样品名保密，条件分别是(1)C18柱;流动相：甲醇-水 70：30;流速：1.0ml/min;室温;进样量：20微升(2)C18柱;流动相：甲醇-水-冰醋酸 40：60：0.02%;流速：1.0ml/min;室温;进样量：20微升。这两个样品的方法学已经经过确认是可以完全分离样品的。两个样品的结构不相似，分子量不大。峰形还可以的，一个略拖尾，对称因子为1.18，另一个更好一些，均没有过载现象。峰面积自动积分和手动积分RSD约为7%-10%。

　　上礼拜工程师来过，检查结果表明，自动进样针的进样量是准确稳定的。

　　另外，实验过程中，柱子的压差比较大，并且不稳定，在流速为 1.0ml/min时约80psi。曾经怀疑是系统内混入了气体，但是经过长时间低流速冲洗，重现性仍然不好。系统内和柱子也没有漏液的现象。

　　这究竟是为什么呢???急切期待各位高人的指教!!!
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1楼 2010-05-26 10:27:28
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caoyexia

银虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
westzilch(金币+1):谢谢交流！ 2010-05-26 10:37:33
有可能柱子有些堵了，否则压力不可能很大
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2楼2010-05-26 10:36:13
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skymahaol

引用回帖:
Originally posted by caoyexia at 2010-05-26 10:36:13:
有可能柱子有些堵了，否则压力不可能很大

同一根柱子，用甲醇-乙腈-水为流动相，流速为1.0ml/min，柱子的压差为33psi左右，用纯甲醇，流速为1.0ml/min，柱子的压差为 25psi左右，可是一换成甲醇-水和甲醇-水-冰醋酸，柱子的压差就马上变的很高了，并且在更换流动相的过程中，柱子没有动过……这是为什么呢？
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3楼2010-05-26 13:43:27
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