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skymahaol

[交流] 【求助】求助:液相,流动相问题? 已有2人参与

WATERS HPLC不知道出现了什么问题,峰面积重现性很不好。

  用了两个样品,样品名保密,条件分别是(1)C18柱;流动相:甲醇-水 70:30;流速:1.0ml/min;室温;进样量:20微升(2)C18柱;流动相:甲醇-水-冰醋酸 40:60:0.02%;流速:1.0ml/min;室温;进样量:20微升。这两个样品的方法学已经经过确认是可以完全分离样品的。两个样品的结构不相似,分子量不大。峰形还可以的,一个略拖尾,对称因子为1.18,另一个更好一些,均没有过载现象。峰面积自动积分和手动积分RSD约为7%-10%。

  上礼拜工程师来过,检查结果表明,自动进样针的进样量是准确稳定的。

  另外,实验过程中,柱子的压差比较大,并且不稳定,在流速为 1.0ml/min时约80psi。曾经怀疑是系统内混入了气体,但是经过长时间低流速冲洗,重现性仍然不好。系统内和柱子也没有漏液的现象。

  这究竟是为什么呢???急切期待各位高人的指教!!!
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caoyexia

银虫 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
westzilch(金币+1):谢谢交流! 2010-05-26 10:37:33
有可能柱子有些堵了,否则压力不可能很大
2楼2010-05-26 10:36:13
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skymahaol

引用回帖:
Originally posted by caoyexia at 2010-05-26 10:36:13:
有可能柱子有些堵了,否则压力不可能很大

同一根柱子,用甲醇-乙腈-水为流动相,流速为1.0ml/min,柱子的压差为33psi左右,用纯甲醇,流速为1.0ml/min,柱子的压差为 25psi左右,可是一换成甲醇-水和甲醇-水-冰醋酸,柱子的压差就马上变的很高了,并且在更换流动相的过程中,柱子没有动过……这是为什么呢?
3楼2010-05-26 13:43:27
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