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xw2129

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】PI法 细胞周期 细胞凋亡 已有10人参与

请教:PI法能不能同时测细胞周期和细胞凋亡?哪位高手做过,请指教一下!
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dhd997

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小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
1949stone(金币+1):够热心 2010-05-26 09:34:31
PI染色,流式细胞仪可以查看细胞被阻断在什么时期。可以啊。
内容来源 http://www.keygentec.com.cn/list ... _q=0&t_id_q=170

荧光标记是研究细胞凋亡的最基本方法。细胞凋亡的形态学变化及生化学变化都可以通过荧光标记的的方法而检测出来,从而区别鉴别出正常细胞、凋亡细胞、坏死细胞以及不同凋亡时期或细胞周期。
碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)是一种DNA结合性染料,其激发和发射波长分别为536nm和617nm,产生红色荧光,但无膜通透性,不能透过活细胞膜,只能染死细胞。因此,在荧光显微镜下观察,正常细胞不能着色,早期凋亡细胞呈微弱红光,晚期凋亡细胞红光加强,坏死细胞呈强红色荧光。采用流式细胞仪检测细胞周期时,凋亡细胞因内源性核酸酶被激活,使DNA广泛降解、断裂,DNA结构发生剧变,随着凋亡的进程,DNA断裂产生的小分子量DNA溢出胞外,细胞总DNA量降低,于正常G0/G1细胞群前出现一DNA低染细胞群,即G1峰前出现亚二倍体峰(sub-G1)或称A0细胞群,即凋亡细胞群。用本试剂盒的PI直接对细胞DNA染色后,进行流式细胞仪分析,即可检测到凋亡细胞DNA的变化。
人生不过几十年,成败荣辱都在天,是非恩怨莫在意,健康快乐最值钱,自古人间苦无边,看得高远境如仙,愿你不为凡事恼,轻松快乐每一天。
3楼2010-05-25 18:55:07
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xinqing617

铜虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
好像PI不能测细胞凋亡,只能测死亡吧!
2楼2010-05-25 18:40:39
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若水寒星

新虫 (初入文坛)

我打算采用流式细胞仪-PI单染法,检测药物抑制细胞凋亡的时期
4楼2010-05-27 16:22:42
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zj0726

铜虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
各位高手,有没有不用流式细胞仪测凋亡率的方法呀?
5楼2010-05-27 17:02:37
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