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miho

铁虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】从植物总RNA中如何分离mRNA 已有10人参与

RT,大家分离mRNA的方法有哪些,要使用试剂盒吗?
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逃离地球,去水星!
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zhangjianii

金虫 (小有名气)

棉花叶片RNA的提取


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我也正准备做,准备提取棉花叶片的mrna,买了promega的试剂盒,要求总的mrna浓度在50ug-1mg,感觉难度好大
11楼2010-05-21 21:58:54
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hyw1989960

木虫 (正式写手)

快乐家族二十八


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
这个需要分离吗?提取的都是总RNA反正接着反转录了,
快乐家族
2楼2010-05-19 20:25:57
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fungixx

至尊木虫 (文坛精英)

优秀版主优秀版主优秀版主


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
试剂盒 clontech。。。
几年前踏上火车那一刻都还没有意识到,从此故乡只有冬夏,再无春秋
3楼2010-05-19 20:26:35
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zhwenxing

木虫 (著名写手)

尛森蟲

★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+3):欢迎多多交流~~ 2010-05-19 21:21:24
1、楼主的意思是必须纯化mRNA?
2、宝生物有mRNA纯化试剂盒,采用oligodT 结合原理,过柱子。大约2K。
3、clontech也有,也不便宜。呵呵
4、沉淀mRNA时候往往产量很低啊,因为mRNA占RNA总量的4-5%,再加上提取中的损失,纯化中的损失,这样,得到的最终mRNA产量不多。
5、那么要求尽量多准备一些高质量的RNA,对mRNA要求浓度较高时候,可再次沉淀浓缩。

祝福好运!
4楼2010-05-19 21:17:43
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