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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】扩的片段发生突变了 怎么再突变回来
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楼1970-01-01 08:00:00
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yinsongna

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by lzhwin at 2010-05-19 17:00:41:
楼主的模板很珍贵或者很难得到吗？
点突变要重新设计引物，经过一轮超长时间的PCR，还要消化模板再转化、筛选，最后测序（还有可能错）。也算是个中等规模的实验了。

请楼主详细说明一下，重新扩增为什么比点 ...

我不是扩了一个 是好几个片段呢 前段时间做酶切链接费了我俩月，要是重新做的话，又是很久很久了
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13楼2010-05-19 19:54:08
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jasco

木虫 (正式写手)
★
yinsongna(金币+1): 2010-05-19 11:29:52
lstt09nk(金币+1):欢迎多多交流~~ 2010-05-19 18:54:53
突变试剂盒，或者突变处合成引物，通过串联pcr修复，

最简单的是重新扩增
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2楼2010-05-19 11:27:07
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yinsongna

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by jasco at 2010-05-19 11:27:07:
突变试剂盒，或者突变处合成引物，通过串联pcr修复，

最简单的是重新扩增

重新合成太费劲了 突变试剂盒貌似很贵，麻烦你可不可以给我说下突变处合成引物，是不是就是在突变的地方设计引物，然后重叠延伸PCR再做链接？
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3楼2010-05-19 11:31:19
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lzhwin

木虫 (正式写手)
yinsongna(金币+1): 2010-05-19 12:43:49
不懂，既然是扩增突变，说明模板应该没问题吧？
重新扩一次不就行了
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4楼2010-05-19 11:33:07
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