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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 【求助】毛细管托尾
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liuyufei3087

金虫 (著名写手)

[交流] 【求助】毛细管托尾 已有4人参与

请问：我做的是细胞色素C与巴氯芬结合的实验，但是当巴氯芬与细胞色素C的混合液进样后总是托尾。我想请教一下，如何改变条件呢？
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1楼 2010-05-18 17:02:31
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mytll

木虫 (正式写手)
是用程序升温的吗？
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2楼2010-05-18 17:04:12
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liuyufei3087

金虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by mytll at 2010-05-18 17:04:12:
是用程序升温的吗？

没有呀，恒温的。
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3楼2010-05-18 17:05:26
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mytll

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
用程序升温试试呀
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4楼2010-05-18 17:14:35
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platto

木虫 (著名写手)

一窍不通
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
佳怡(金币+2):感谢回复 2010-05-18 20:29:56
楼主是用的GC还是CE？估计是CE吧？
如果是CE，使用裸管的话，拖尾是必然的，因为细胞色素c是碱性蛋白质，必须使用含有添加剂的buffer或使用涂层管分析。
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七窍通了六窍
5楼2010-05-18 17:31:49
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liuyufei3087

金虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by platto at 2010-05-18 17:31:49:
楼主是用的GC还是CE？估计是CE吧？
如果是CE，使用裸管的话，拖尾是必然的，因为细胞色素c是碱性蛋白质，必须使用含有添加剂的buffer或使用涂层管分析。

同学，谢谢你的回复，你能说的再具体些吗？谢谢了
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6楼2010-05-18 17:44:17
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platto

木虫 (著名写手)

一窍不通
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
佳怡(金币+3):呵呵，谢谢耐心回复~ 2010-05-20 19:35:17
佳怡(ACI+1):~~ 2010-05-20 19:35:25
一般认为：石英毛细管在一定的pH下硅羟基能够发生电离，从而使得毛细管内壁带有负电荷，这也就是电渗流产生的根本原因。而作为碱性蛋白质，由于其分子上的氨基较多，使得该蛋白质在中性条件下带有正电荷，蛋白质上的正电荷和毛细管内壁的负电荷相互的静电引力使得蛋白质的电泳行为发生改变，最终引起拖尾。
因此，拖尾解决的方案主要是通过向buffer里添加添加剂或涂层修饰毛细管屏蔽毛细管电离的硅羟基，从而改善峰形。
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七窍通了六窍
7楼2010-05-19 13:48:02
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liuyufei3087

金虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by platto at 2010-05-19 13:48:02:
一般认为：石英毛细管在一定的pH下硅羟基能够发生电离，从而使得毛细管内壁带有负电荷，这也就是电渗流产生的根本原因。而作为碱性蛋白质，由于其分子上的氨基较多，使得该蛋白质在中性条件下带有正电荷，蛋白质上 ...

是这样的，我用的柱子是空的，如果在样品里加入添加剂的话多是加入哪种啊？感谢您的回复！
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8楼2010-05-19 14:11:43
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lee10yie

捐助贵宾 (著名写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
佳怡(金币+2):感谢回复，欢迎常来分析版 2010-05-20 19:35:38
分离蛋白质常用的添加剂有表面活性剂，如SDS，CTAB，DDAB，还有一些天然的表面活性物质如胆酸钠等，不过你要考虑这些添加剂可能会影响细胞色素c与巴氯芬的结合
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9楼2010-05-19 19:33:34
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platto

木虫 (著名写手)

一窍不通
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
同意楼上观点。还请楼主注意。
建议使用线性聚丙烯酰胺凝胶毛细管电泳吧。自己做根柱子，发文章也有利。
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七窍通了六窍
10楼2010-05-20 11:43:33
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