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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 【求助】梯度洗脱极性
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xuyannd

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助】梯度洗脱极性 已有6人参与

请教一下各位：我做的某中药采用聚酰胺柱分离得到70%乙醇洗脱片段和95%乙醇洗脱片段，然后进液相采用如下梯度洗脱程序：0-10min 5%乙腈，10-35min 20%乙腈，35-50min 35%乙腈， 50-60min 45%乙腈，60-70min  65%乙腈，70-85min  90%乙腈，85-95min  5%乙腈，得到的95%乙醇洗脱片段中有一个主要的峰在85.9min，其余的几个小峰也在80min左右，那么我们这几个物质的极性是怎么样的？用什么溶剂可以萃取得到啊？朢有经验的指导一下啊！
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1楼 2010-05-17 10:00:26
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xiaodu2007693

木虫 (著名写手)

药学版~龙猫
★
xuyannd(金币+5): 2010-05-17 21:37:49
huqiu1953(金币+1):感谢您认真发言参与交流~ 2010-05-24 08:57:15
首先，你的梯度设的太多了，没必要，前70分钟都没有成分
其次，如果你说的对，85.9是你的成分，那它的极性相当小了，90%的乙腈洗脱能力是超强了，但我个人认为那个不一定是你的成分，因为最后10min你的溶剂系统回归到5%的乙腈，可能是溶剂峰
最后，给你个建议，起始的比例设为50%，直到100%的乙腈，中间可以多设2-3个，看看你的大峰能出来不，如果没出来，那它就不是成分，如果是，自然会出来的。建议后面85-95min，这个梯度去掉。
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欢迎您来药学版~
3楼2010-05-17 21:09:31
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qingyue329

金虫 (小有名气)
★
xiaodu2007693(金币+1):谢谢交流~ 2010-05-17 21:02:33
xuyannd(金币+5): 2010-05-17 21:35:01
xuyannd(金币+5): 2010-05-17 21:37:28
本人最近在HPLC，一点经验提供给您，希望有所帮助：
首先，感觉你的基线不太平，不知道用的波长是什么，考虑一下出的峰的确是要的东西——你可以进个空针，对照一下；
其次，若你要的东西，确定是在后面八十多分钟才出峰，那么肯定极性不大，应选择极性小的溶剂吧。
另有一点不明，你梯度洗脱，乙腈应该一直比例增加啊，为什么最后是5%呢？
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2楼2010-05-17 20:44:36
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xuyannd

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by qingyue329 at 2010-05-17 20:44:36:
本人最近在HPLC，一点经验提供给您，希望有所帮助：
首先，感觉你的基线不太平，不知道用的波长是什么，考虑一下出的峰的确是要的东西——你可以进个空针，对照一下；
其次，若你要的东西，确定是在后面八十多分 ...

梯度洗脱程序最后不是要有一段平衡时间吗，我最后的85-95min是用来平衡的啊，请问你们不是这样做吗吗？
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4楼2010-05-17 21:46:17
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xiaodu2007693

木虫 (著名写手)

药学版~龙猫
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by xuyannd at 2010-05-17 21:46:17:



   梯度洗脱程序最后不是要有一段平衡时间吗，我最后的85-95min是用来平衡的啊，请问你们不是这样做吗吗？

那也只能叫做是用来平衡的，不能算是你的梯度了
包括在写论文的时候，你还要把这个写进去吗
所以，在最后那10min出来的东西不能算是你的成分了

[ Last edited by xiaodu2007693 on 2010-5-23 at 16:05 ]
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欢迎您来药学版~
5楼2010-05-17 23:40:37
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