应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药理学 » 【求助】求助：细胞实验用FFA的配制
51/1返回列表
查看: 3817  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

394210516x

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助】求助：细胞实验用FFA的配制 已有5人参与

各位虫友，你们细胞实验时要用到FFA时，如何进行配制啊？

我在网上查了好多方法，还有一些国内的文献，都说配制前，先用乙醇或石油醚溶解一定质量的脂肪酸，装进一个干净的瓶子中。氮气吹干，然后用0.15M KOH溶解。即可以使用。如果需要使用BSA，则事先和溶解于PBS中定量的BSA溶液按比例混合。


还有几篇文献中是这样的：
FFA溶液的制备 （文献一）：FFA贮备液中油酸与棕榈酸的比例为2∶1。溶解所需剂量的油酸和棕榈酸于10 mL 99%酒精中，振摇1 h。每10 mmol/L FFA加入40 μL的NaOH（10 mol/L），混匀，置于通风橱中过夜干燥。加入10 mL蒸馏水，加热溶液至呈透明皂液样时，加入40 mL冰冷的10%小牛血清白蛋白，混匀。经0.22 μm CA过滤器过滤消毒后将FFA贮备液存于-20 ℃。

FFA 的配制（文献二）:取棕榈酸 ,用乙醇配制成 100 mmol/ L的浓度;取不含 FFA 的牛血清白蛋白 ,用蒸馏水配制成 10 %的溶液;取 50μl 100 mmol/ L  FFA 溶液 ,加入上述10 %BSA 溶液中 ,在55  ℃水浴中静置15 min ,直至溶液澄清 , -  20  ℃保存。


在这里我想问：为什么要用氮气吹干呢，用超净工作台上的风把它吹干行吗，先将其溶解又将其吹干的道理是什么？用乙醇只是溶解而没有发生化学反应生成乙醇酯吧？乙醇是不是在挥干的过程中全部挥发了？用乙醇溶解后FFA的浓度一般是多少？还有一定要加BSA吗？如果我不加呢？加入BSA的原理又是什么？配制时NaOH和FFA的比例又是多少呢？配制好后为何会出现浑浊？


望哪位高手能帮我解答一下，万分感谢！！
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

useful

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2010-05-16 21:54:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

鲲创科技

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by 盖世宇航12 at 2018-11-24 11:38:30
解决了吗 ，我也很急

这个溶解问题，我有发表过相关帖子

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
(棕榈酸钠油酸钠www.xakckj.cn)
8楼2019-02-28 21:32:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

药道人

荣誉版主 (文坛精英)

净由秽生，明从闇出

优秀版主优秀版主
394210516x(金币+1):谢谢啊 2010-05-21 13:18:43
跟你说，这个是个非常麻烦的实验

不知道你是不是做脂肪肝还是动粥

氮气吹干是为了避免氧化

一定加BSA，而且要加无FFA的BSA


ps：你文献看的太少了
赞一下 回复此楼
来时胡涂去时迷，空在人间走这回。未曾生我谁是我，生我之后我是谁？长大成人方知我，合眼朦胧又是谁？不如不来也不去，亦无烦恼亦无悲。
2楼2010-05-21 12:43:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

药道人

荣誉版主 (文坛精英)

净由秽生，明从闇出

优秀版主优秀版主
394210516x(金币+1):谢谢啊，我是CPU的，我的QQ是423419212，不知道怎么联系你啊 2010-05-21 13:19:37
引用回帖:
Originally posted by 394210516x at 2010-05-16 21:54:57:
各位虫友，你们细胞实验时要用到FFA时，如何进行配制啊？

我在网上查了好多方法，还有一些国内的文献，都说配制前，先用乙醇或石油醚溶解一定质量的脂肪酸，装进一个干净的瓶子中。氮气吹干，然后用0.15M KOH ...

你如果是cpu的，请联系我
赞一下 回复此楼
来时胡涂去时迷，空在人间走这回。未曾生我谁是我，生我之后我是谁？长大成人方知我，合眼朦胧又是谁？不如不来也不去，亦无烦恼亦无悲。
3楼2010-05-21 12:44:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

0640409

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by 药道人 at 2010-05-21 12:44:34:
你如果是cpu的，请联系我

学长有什么好的制作方法吗，我也急用。先谢谢了
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2011-09-17 19:01:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 k0dTPqJtl0jt 2026-08-14 4/200 2026-08-15 01:40 by 4wMiSEwB6436
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 HFw0lei2R37i 2026-08-14 5/250 2026-08-15 00:16 by 4wMiSEwB6436
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 22/1100 2026-08-14 23:45 by Noways
[基金申请] filecode +6 cratir 2026-08-14 10/500 2026-08-14 18:29 by 笑叹辞穷
[基金申请] 有时候，自然基金真的不能太认真 （我的申报经验） +6 majunge000 2026-08-11 8/400 2026-08-14 14:44 by 医学老男孩
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +23 Lanmanbaby 2026-08-09 37/1850 2026-08-14 13:40 by Equinoxhua
[硕博家园] 请教兼职经验 +3 是阿文鸭 2026-08-09 3/150 2026-08-14 12:07 by HER12025
[基金申请] FileCode能看出啥？ +10 要乐观耀哥 2026-08-10 32/1600 2026-08-14 09:37 by 要乐观耀哥
[基金申请] 我的国基提前知道中了，可是同事的操作让我实在接受不了，怎么会有这样的人 +10 家与远方 2026-08-10 15/750 2026-08-14 02:08 by 绵羊哥哥
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +9 majunge000 2026-08-10 12/600 2026-08-13 23:20 by iwuli
[硕博家园] 一作与独作在应聘高校教师时区别大吗 +3 mbygzh 2026-08-08 4/200 2026-08-13 19:31 by 龙-樱
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] Filecode 又变了，巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分？ +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 什么时候出结果，有咨询渠道？？？ +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] fileCode有新解读？ +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[基金申请] 关于filecode，很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭