应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药理学 » 【求助】求助：细胞实验用FFA的配制
51/1返回列表
查看: 3826  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

394210516x

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助】求助：细胞实验用FFA的配制 已有5人参与

各位虫友，你们细胞实验时要用到FFA时，如何进行配制啊？

我在网上查了好多方法，还有一些国内的文献，都说配制前，先用乙醇或石油醚溶解一定质量的脂肪酸，装进一个干净的瓶子中。氮气吹干，然后用0.15M KOH溶解。即可以使用。如果需要使用BSA，则事先和溶解于PBS中定量的BSA溶液按比例混合。


还有几篇文献中是这样的：
FFA溶液的制备 （文献一）：FFA贮备液中油酸与棕榈酸的比例为2∶1。溶解所需剂量的油酸和棕榈酸于10 mL 99%酒精中，振摇1 h。每10 mmol/L FFA加入40 μL的NaOH（10 mol/L），混匀，置于通风橱中过夜干燥。加入10 mL蒸馏水，加热溶液至呈透明皂液样时，加入40 mL冰冷的10%小牛血清白蛋白，混匀。经0.22 μm CA过滤器过滤消毒后将FFA贮备液存于-20 ℃。

FFA 的配制（文献二）:取棕榈酸 ,用乙醇配制成 100 mmol/ L的浓度;取不含 FFA 的牛血清白蛋白 ,用蒸馏水配制成 10 %的溶液;取 50μl 100 mmol/ L  FFA 溶液 ,加入上述10 %BSA 溶液中 ,在55  ℃水浴中静置15 min ,直至溶液澄清 , -  20  ℃保存。


在这里我想问：为什么要用氮气吹干呢，用超净工作台上的风把它吹干行吗，先将其溶解又将其吹干的道理是什么？用乙醇只是溶解而没有发生化学反应生成乙醇酯吧？乙醇是不是在挥干的过程中全部挥发了？用乙醇溶解后FFA的浓度一般是多少？还有一定要加BSA吗？如果我不加呢？加入BSA的原理又是什么？配制时NaOH和FFA的比例又是多少呢？配制好后为何会出现浑浊？


望哪位高手能帮我解答一下，万分感谢！！
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

useful

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2010-05-16 21:54:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

鲲创科技

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by 盖世宇航12 at 2018-11-24 11:38:30
解决了吗 ，我也很急

这个溶解问题，我有发表过相关帖子

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
(棕榈酸钠油酸钠www.xakckj.cn)
8楼2019-02-28 21:32:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

药道人

荣誉版主 (文坛精英)

净由秽生，明从闇出

优秀版主优秀版主
394210516x(金币+1):谢谢啊 2010-05-21 13:18:43
跟你说，这个是个非常麻烦的实验

不知道你是不是做脂肪肝还是动粥

氮气吹干是为了避免氧化

一定加BSA，而且要加无FFA的BSA


ps：你文献看的太少了
赞一下 回复此楼
来时胡涂去时迷，空在人间走这回。未曾生我谁是我，生我之后我是谁？长大成人方知我，合眼朦胧又是谁？不如不来也不去，亦无烦恼亦无悲。
2楼2010-05-21 12:43:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

药道人

荣誉版主 (文坛精英)

净由秽生，明从闇出

优秀版主优秀版主
394210516x(金币+1):谢谢啊，我是CPU的，我的QQ是423419212，不知道怎么联系你啊 2010-05-21 13:19:37
引用回帖:
Originally posted by 394210516x at 2010-05-16 21:54:57:
各位虫友，你们细胞实验时要用到FFA时，如何进行配制啊？

我在网上查了好多方法，还有一些国内的文献，都说配制前，先用乙醇或石油醚溶解一定质量的脂肪酸，装进一个干净的瓶子中。氮气吹干，然后用0.15M KOH ...

你如果是cpu的，请联系我
赞一下 回复此楼
来时胡涂去时迷，空在人间走这回。未曾生我谁是我，生我之后我是谁？长大成人方知我，合眼朦胧又是谁？不如不来也不去，亦无烦恼亦无悲。
3楼2010-05-21 12:44:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

0640409

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by 药道人 at 2010-05-21 12:44:34:
你如果是cpu的，请联系我

学长有什么好的制作方法吗，我也急用。先谢谢了
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2011-09-17 19:01:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜？ +7 Ldrop2023 2026-08-13 7/350 2026-08-15 15:57 by mzhh2000
[论文投稿] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 k0dTPqJtl0jt 2026-08-14 5/250 2026-08-15 15:10 by QXtWNz7PI7wZ
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 k0dTPqJtl0jt 2026-08-14 5/250 2026-08-15 14:58 by QXtWNz7PI7wZ
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 7lpolszZVXgi 2026-08-14 3/150 2026-08-15 14:53 by QXtWNz7PI7wZ
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 HFw0lei2R37i 2026-08-14 8/400 2026-08-15 14:41 by QXtWNz7PI7wZ
[考博] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 HFw0lei2R37i 2026-08-14 5/250 2026-08-15 11:41 by KxMI1BYBxWX1
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +5 7lpolszZVXgi 2026-08-14 6/300 2026-08-15 09:28 by sunzitan
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 7lpolszZVXgi 2026-08-14 5/250 2026-08-15 04:41 by 4wMiSEwB6436
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的，真有人买论文么？感觉没必要啊 +11 Tide man 2026-08-10 12/600 2026-08-15 02:12 by home3163
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 HFw0lei2R37i 2026-08-14 5/250 2026-08-14 22:32 by 4wMiSEwB6436
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +23 Lanmanbaby 2026-08-09 37/1850 2026-08-14 13:40 by Equinoxhua
[硕博家园] 请教兼职经验 +3 是阿文鸭 2026-08-09 3/150 2026-08-14 12:07 by HER12025
[基金申请] FileCode能看出啥？ +10 要乐观耀哥 2026-08-10 32/1600 2026-08-14 09:37 by 要乐观耀哥
[基金申请] 我的国基提前知道中了，可是同事的操作让我实在接受不了，怎么会有这样的人 +10 家与远方 2026-08-10 15/750 2026-08-14 02:08 by 绵羊哥哥
[硕博家园] 一作与独作在应聘高校教师时区别大吗 +3 mbygzh 2026-08-08 4/200 2026-08-13 19:31 by 龙-樱
[基金申请] Filecode 又变了，巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 结合人工智能，周易传统文化，filecode打分制来了，3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见，大家看看几个A，几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分？ +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 什么时候出结果，有咨询渠道？？？ +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭