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pidou213木虫 (正式写手)
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[交流]
【求助/交流】同时转3个基因 已有8人参与
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我现在想同时转三个基因 思路1、将三个基因通过酶切、连接，弄到一个载体上，然后转菌； 问题：什么质粒能够多次酶切？会不会影响质粒的表达？ 有没有很成熟的载体来连接两个或者两个以上的基因片段？ 思路2、转化时，将三个载体（分别连着三个基因），一起转化，通过筛选标记，反推片段是否转进菌体。 问题：载体不相容的问题；这样转的概率很低； 请虫友们帮助分析，万分感谢 |
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pidou213
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9楼2010-05-15 12:04:28
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xiangao
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scelab(金币+3):英文达人？ 2010-05-14 21:18:01
scelab(金币+3):英文达人？ 2010-05-14 21:18:01
| 宿主菌是什么？ 第一个思路估计连上表达也很微弱（metabolic burden）,However you can chooose and construct suitable plasmid with three dinstinct expression cassette； for another question what you worried indeed exist, the most important thing is to use plasmids with compatible origins |
3楼2010-05-14 19:55:04
4楼2010-05-14 20:00:52