24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 888  |  回复: 5

deusrwaf

铁虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】酶液解冻后会有沉定,这是为什么。 已有4人参与

问题如题:我是用PH7.2的PBS提取黄瓜叶片的蛋白,放在-40度的冰箱里,第二天拿出离心解冻或者放在冰上解冻往往会有沉淀产生。不知道这是蛋白还是别的什么?请高手指教啊?我们实验室别的组提拟南芥或者水稻都没有这事。
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

deusrwaf

铁虫 (小有名气)

静待高手出现啊
2楼2010-05-13 19:14:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ERIC20081938

铁杆木虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
是不是蛋白变性哦,不同蛋白质可能稳定性不同,变性条件不同···
Flytothesky```
3楼2010-05-13 20:41:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

deusrwaf

铁虫 (小有名气)

那楼上有没有稳定的PH缓冲液推荐?HEPES行不行。正在测解冻后的浓度,比较解冻前的看沉淀是不是蛋白质。我是用PBS直接磨黄瓜叶 片,然后离心再吸取上清液冷冻的。
4楼2010-05-13 21:20:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liyong1981

金虫 (正式写手)


煮煮,再让他复性
5楼2010-05-14 11:51:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

月月大可

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
先离心,收集沉淀、上清跑胶看看沉淀是不是你的目的蛋白,上清中还有没有目的蛋白。
沉淀是你的目的蛋白:
1、 考虑能不能加入底物、复合物等稳定蛋白性质;
2、提高Buffer盐的浓度;
3、液氮速冻,冰上融化。
尝试吧,我的蛋白原来一冻就沉,现在好了。
6楼2010-05-14 12:13:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 deusrwaf 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 265求调剂 +16 林深温澜 2026-04-01 19/950 2026-04-03 11:24 by zhangdingwa
[考研] 071000生物学调剂 +8 知昭蔓 2026-04-02 8/400 2026-04-03 10:36 by macy2011
[考研] 生物学求调剂 +3 15064154688 2026-04-03 3/150 2026-04-03 10:28 by macy2011
[考研] 262求调剂 +6 励志一定发文章 2026-04-02 7/350 2026-04-03 09:54 by linyelide
[考研] 材料调剂 +4 一样YWY 2026-04-03 4/200 2026-04-03 09:48 by 蓝云思雨
[考研] 296求调剂 +4 sdhu 2026-04-02 4/200 2026-04-02 21:29 by baoball
[考研] 材料340分调剂 +7 夏夜晚风_long 2026-04-02 9/450 2026-04-02 21:20 by dongzh2009
[考研] 材料0856 英一数二 323 求调剂 +10 袁sy 2026-04-01 10/500 2026-04-02 19:52 by xingsh
[考研] 求调剂 +7 Aniyaio 2026-04-02 7/350 2026-04-02 16:42 by zzsw+
[考研] 318求调剂,计算材料方向 +10 吸喵有害笙命 2026-04-01 11/550 2026-04-02 16:29 by oooqiao
[考研] 一志愿085600中科院宁波所276分求调剂 +26 材料学257求调剂 2026-03-28 27/1350 2026-04-02 15:15 by chyhaha
[考研] 286分调剂 +20 Faune 2026-03-30 22/1100 2026-04-02 13:24 by clyblh
[考研] 302求调剂一志愿北航070300,本科郑大化学 +8 圣日耳曼条 2026-04-01 11/550 2026-04-02 07:40 by chemdavid
[考研] 285求调剂 +11 AZMK 2026-04-01 11/550 2026-04-01 22:40 by peike
[考研] 0856求调剂 +9 楒桉 2026-03-28 9/450 2026-03-31 19:06 by 暮泽12
[考研] 材料与化工272求调剂 +25 阿斯蒂芬2004 2026-03-28 25/1250 2026-03-31 16:27 by hypershenger
[考研] 求收留 +8 1943443204 2026-03-28 8/400 2026-03-31 15:00 by -迷了路啊路
[考研] 313求调剂 +6 卖个关子吧 2026-03-31 6/300 2026-03-31 10:58 by Jaylen.
[考研] 266求调剂 +3 哇呼哼呼哼 2026-03-29 3/150 2026-03-31 10:06 by cal0306
[考研] 105500药学求调剂,一志愿山东大学药学,348分 +3 gr哈哈哈 2026-03-28 3/150 2026-03-30 18:56 by 源_2020
信息提示
请填处理意见