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【求助/交流】内切酶Bbvc1的问题 已有3人参与
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| 用Bbvc1和Asc1 双切载体和片段，载体8K片段5K结果总是连不上，已经重复了很多遍，是粘端连为什么总也连不上，是不是Bbvc1切后很难在连上啊？有用过这个酶的朋友可以分享一下你们的经验吗？ |
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fungixx
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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
plantaqp(金币+3):欢迎交流 2010-05-16 02:30:30
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我用过Bbvc1这酶，这酶耽误了我好长时间。。。 你怎么会用到这种稀有酶呢，最好是避开啊。 应该用的也是NEB的吧，识别7碱基，酶切效率挺低的，切开后连接效率也很低。 估计你连不上很可能是载体上的酶切位点没有切开，是不是转化子都是空载体啊? 当时我是利用了载体上另外一个酶切位点，和Bbvc1以及另外一种酶做的三酶切，保证Bbvc1酶切位点是完全切开，然后做三片段连接的，一次就成功了。。。 可能说的不太清楚，你如果还有什么疑问，随时解答。。。 |
2楼2010-05-15 16:14:34
3楼2010-05-15 22:47:05
4楼2010-05-16 01:24:50
5楼2010-05-16 12:39:19