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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药理学 » 【求助】96孔微量加药
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pinbonanren

新虫 (小有名气)

[交流] 【求助】96孔微量加药 已有7人参与

在用96孔板做药物实验的时候，我需要将20ul的药物加到180ul的含有2%胎牛血清的培养液中，20ul的药物需要将枪头插入培养液里加或者刷枪头吗？悬空加和进行刷枪头混匀对实验结果有什么差别吗？多少剂量以下需要刷枪头？我的药物是全部溶解的。
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1楼 2010-05-11 10:41:55
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eaten

木虫 (正式写手)
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westzilch(金币+1):谢谢交流！ 2010-05-11 15:43:49
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2楼2010-05-11 15:38:17
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pinbonanren

新虫 (小有名气)
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3楼2010-06-13 22:58:25
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freshblack

金虫 (正式写手)
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karl2100(金币+1):多谢指教！ 2010-06-15 00:55:28
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Originally posted by pinbonanren at 2010-06-13 22:58:25:

可是理论上讲，悬空加药，药物肯定不能完全混匀啊，如果不能完全混匀就不能均匀的作用到孔底的细胞上，那么实验结果必然会有影响。

LZ确定是加到含血清的培养基中么？血清对药物作用有一定影响的。
我做这类实验的时候分三步，第一药物和无血清培养基在子弹头里配好（刷枪头的），混匀；第二讲96孔板中含血清培养基吸出，弃去；第三将配好的药物和无血清培养基混合溶液加入孔中
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勤有功，戏无益，满招损，谦得益
4楼2010-06-14 19:20:26
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xiaomi1208

金虫 (正式写手)
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我是悬空加的  实验结果还不错  向楼上的学习了  将药和无血清培养液混匀加到孔里  很不错也  厉害厉害   学习啦
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5楼2010-06-16 22:23:46
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pinbonanren

新虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by pinbonanren at 2010-06-13 22:58:25:

可是理论上讲，悬空加药，药物肯定不能完全混匀啊，如果不能完全混匀就不能均匀的作用到孔底的细胞上，那么实验结果必然会有影响。

我的药物不能提前和培养基混溶在一起的，因为在加药之前我还需要往孔内加入一种诱导剂180ul作用1小时之后再加入20ul的药物，所以我必须加入小剂量的药物。
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6楼2010-07-21 11:25:10
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pinbonanren

新虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by freshblack at 2010-06-14 19:20:26:


LZ确定是加到含血清的培养基中么？血清对药物作用有一定影响的。
我做这类实验的时候分三步，第一药物和无血清培养基在子弹头里配好（刷枪头的），混匀；第二讲96孔板中含血清培养基吸出，弃去；第三将配好的 ...

细胞在不含有血清的培养基能正常生长吗？我加药都是加入到汗2%血清的培养液种。我的药物不能提前和培养基混溶在一起的，因为在加药之前我还需要往孔内加入一种诱导剂180ul作用1小时之后再加入20ul的药物，所以我必须将小剂量的药物加入已经含有培养液的孔内。
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7楼2010-07-21 11:28:10
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freshblack

金虫 (正式写手)
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Originally posted by pinbonanren at 2010-07-21 11:28:10:

细胞在不含有血清的培养基能正常生长吗？我加药都是加入到汗2%血清的培养液种。我的药物不能提前和培养基混溶在一起的，因为在加药之前我还需要往孔内加入一种诱导剂180ul作用1小时之后再加入20ul的药物，所以我 ...

能，但是长得比较慢。一开始接板的时候用含血清的培养基进行培养，长到90%融合时即可以给药的时候，把含血清的培养基吸出，弃去，换不含血清的培养基。
按照你的说法，我感觉加药时是需要刷枪头的
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8楼2010-07-22 12:27:49
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pinbonanren

新虫 (小有名气)
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Originally posted by freshblack at 2010-07-22 12:27:49:



能，但是长得比较慢。一开始接板的时候用含血清的培养基进行培养，长到90%融合时即可以给药的时候，把含血清的培养基吸出，弃去，换不含血清的培养基。
按照你的说法，我感觉加药时是需要刷枪头的

你好，首先谢谢你的热心回答。还有一个问题需要请教。我们做细胞实验，第一步都是用正常培养细胞的培养液接种细胞到培养板子上，等细胞长一天或者待其长满孔面积的百分之90%左右之后再将孔内培养液吸弃，之后再加入不含血清之培养液溶解的药物吗？难道不能在第一步接种板子的时候就用含有药物的培养液进行吹打细胞接种细胞，之后作用24小时或者其他时间后进行检测呢？
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9楼2011-01-04 09:40:05
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freshblack

金虫 (正式写手)
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chzhbin(金币+1):谢谢指教 2011-01-05 14:33:53
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Originally posted by pinbonanren at 2011-01-04 09:40:05:


你好，首先谢谢你的热心回答。还有一个问题需要请教。我们做细胞实验，第一步都是用正常培养细胞的培养液接种细胞到培养板子上，等细胞长一天或者待其长满孔面积的百分之90%左右之后再将孔内培养液吸弃，之后 ...

如果一步做完的话，有可能接种密度会有影响，而且药物加入后如果细胞不再生长，不好说明问题。
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勤有功，戏无益，满招损，谦得益
10楼2011-01-04 16:13:40
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