| 查看: 4427 | 回复: 19 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[交流]
【求助】生物样品的前处理-沉淀蛋白质 已有12人参与
|
|||
|
书上讲的和一篇文献里讲的有些矛盾，但是我又是初学者不敢确定自己理解得对不对，想和虫友们讨论一下。 生物样品进高效前都要经过前处理，在沉淀蛋白质时有一种方法是加入能与水混溶的有机溶剂。 一、书上讲到 “加入甲醇或乙腈后对血浆样品有一定的稀释作用，上清液中药物浓度会比原来低，且由于甲醇或乙腈的存在无法再用三氯甲烷、乙酸乙酯等有机溶剂萃取和浓集，甲醇-水（或乙腈-水）的混合液也很难挥干浓集，因此用甲醇或乙腈沉淀蛋白质直接进行测定的方法有时达不到反相HPLC测定灵敏度要求"。 二、但是我在一篇文献上又看到 '血浆样品为0.5 mL,加于聚丙烯离心管中;加入0·7 mL甲醇,手动振摇1 min; 3 500 r/min离心10 min;取上清液于另一离心管中,以0.5 mol/LNaOH调节pH至9;加入0.5 mL三氯甲烷,手动震摇10 min;然后以3 500 r/min离心10 min;取上清液,用0.5 mL三氯甲烷再提取一次后,小心弃去上清与氯仿层中间的变性蛋白层,合并二次的氯仿层, 40~50℃水浴挥干氯仿;在剩余残渣中加入500μL流动相,震荡使其溶解,过滤后上样。' 文献里用甲醇做变性剂后继续用三氯甲烷来提取 是不是有问题啊 [ Last edited by 小珍珍 on 2010-5-8 at 14:08 ] |
回复此楼» 猜你喜欢
麻烦专家们看看评委们的意见（F口面上）
已经有12人回复
-
面上函评意见出来了，像什么等级？
已经有14人回复
-
怎么看青基中了没有啊
已经有6人回复
-
国社科又开始会评了，不知道这次命运如何
已经有11人回复
-
有多少人是今天查系统知道结果的？
已经有19人回复
-
基金未中，这种答复是模板吗？
已经有7人回复
-
哪位高人中了，把查询到的截图贴出来让我看看，让我长长见识
已经有7人回复
-
面上意见出来了
已经有23人回复
-
能否申诉？
已经有8人回复
-
梦想
已经有5人回复
19楼2014-04-25 15:23:29
hongqianqian
银虫 (小有名气)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 1558.1
- 红花: 1
- 帖子: 298
- 在线: 36.6小时
- 虫号: 552540
- 注册: 2008-04-29
- 性别: MM
- 专业: 药物代谢与药物动力学
2楼2010-05-08 16:16:13
3楼2010-05-08 20:01:34
billy96406
铁杆木虫 (小有名气)
- 应助: 6 (幼儿园)
- 金币: 5877.6
- 红花: 1
- 帖子: 160
- 在线: 487.9小时
- 虫号: 261603
- 注册: 2006-06-24
- 性别: GG
- 专业: 有机合成
4楼2010-05-08 21:30:27
