【求助/交流】问个问题,测PCR产物序列的时候会不会测出引物的序列? - 分子生物 - 综合其他

版块导航: 正在加载中...

客户端APP下载

论文辅导

申博辅导

登录注册

应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜

>论坛更新日志 (4346)
>文献求助 (471)
>虫友互识 (402)
>导师招生 (377)
>考博 (206)
>博后之家 (183)
>硕博家园 (163)
>休闲灌水 (162)
>论文投稿 (136)
>基金申请 (96)
>考研 (74)
>招聘信息布告栏 (70)
>教师之家 (60)
>绿色求助(高悬赏) (47)
>公派出国 (46)
>找工作 (42)

返回列表

hongrunge

铁杆木虫 (小有名气)

应助: 4 (幼儿园)
金币: 7987.6
帖子: 286
在线: 272.8小时
虫号: 584934
注册: 2008-08-01
专业: 环境微生物学

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流

引用回帖:

Originally posted by 蓝粉笔 at 2010-05-05 14:26:07:
你测序送样为PCR产物时，所得到的结果里不会有PCR扩增引物序列的，因为现在测序使用的原理都是SANGER测序法：使用带有荧光的dNTP及ddNTP进行链延长，电泳记录信号，引物上是没有荧光信号的，所以结果上是看不到引 ...

正解

回复此楼

11楼2010-05-06 11:47:14

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

姜大磊

木虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 3645.9
散金: 236
红花: 1
帖子: 188
在线: 210.1小时
虫号: 868835
注册: 2009-10-11
性别: GG
专业: 生物技术

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流

引用回帖:

Originally posted by 蓝粉笔 at 2010-05-05 14:48:27:
你测序送样为PCR产物时，所得到的结果里不会有PCR扩增引物序列的，因为现在测序使用的原理都是SANGER测序法：使用带有荧光的dNTP及ddNTP进行链延长，电泳记录信号，引物上是没有荧光信号的，所以结果上是看不到引 ...

楼上的说的同样解决了我的问题的一部分。我借助宝地也问个问题吧：我的电泳条带是1600多的，送去测序的时候，测了两个反应的，但是每一个反应给我的结果都是1100左右，这样加起来就2000多bp了，我该怎么找出的要的那个1600的序列啊，，谢谢大侠指教。

赞一下(1人)

回复此楼

Nevergiveup,neverslowdown;Nevergrowold,nevereverdieyoung......

12楼2010-05-06 12:08:17

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

nklyw

木虫 (正式写手)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 1772.6
散金: 28
红花: 1
帖子: 645
在线: 66.4小时
虫号: 843751
注册: 2009-09-08
专业: 病原细菌与放线菌生物学

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流

肯定有的

回复此楼

13楼2010-05-06 12:33:16

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

蓝粉笔

铁虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 6.6
帖子: 15
在线: 1.3小时
虫号: 786312
注册: 2009-06-03

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流

引用回帖:

Originally posted by 姜大磊 at 2010-05-06 12:08:17:

楼上的说的同样解决了我的问题的一部分。我借助宝地也问个问题吧：我的电泳条带是1600多的，送去测序的时候，测了两个反应的，但是每一个反应给我的结果都是1100左右，这样加起来就2000多bp了，我该怎么找出的要 ...

接我的上文：每次测序结果开头的20bp左右是不太可信的，而且没有引物那段，所以想要把PCR产物测全就要双向测序，用拼接软件把双向结果拼接起来得到全长。
大家都希望每次测序是尽可能的长，但是后面很多是不可信的了，一般600bp，好的能到800bp,这要具体分析。双向测出来的结果是有重合区域的，所以不是1100+1100=2200，而是拼接后的序列，因为不管怎样是不会超出PCR产物的长度的。
希望对大家有帮助，我做过一段时间测序，如果有问题可以再问，尽我所能告诉大家。