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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】冷冻干燥 匀浆器均质与液氮研磨
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lzhwin

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】冷冻干燥 匀浆器均质与液氮研磨 已有3人参与

求教各位：这三者有什么区别，分别适用于什么？
实际上冷冻干燥跟后面的两个不属于同类型的实验。与冷冻干燥对应的应该是液氮冷冻-80度保存。两者分别用于什么实验呢？

我最想知道的是匀浆器均质与液氮研磨有什么不同？我们做实验（蛋白核算提取）几乎全部都是用液氮研磨来完成。近来本人关注的鞘脂提取却全部使用匀浆器均质实现提取。过去我一直认为液氮研磨是万能的方法，瞬间的低温会避免一切的分解与失活，现在看来并不是这样的。

有谁做过类似的实验吗？讲讲它们的区别和适用范围
谢谢！
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1楼 2010-05-04 11:34:47
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hezhao999

木虫 (正式写手)
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lstt09nk(金币+2):欢迎多多交流~~ 2010-05-04 12:16
晕啊。。
冷冻干燥主要是干燥用的，为了保持样品活性；
液氮研磨低温下保持样品活性的提取
匀浆在常温下只要样品不失活就行，提取量要比液氮研磨大把
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2楼2010-05-04 12:05:11
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lingn

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louyiceng(金币+1):谢谢参与 2010-05-04 13:34:12
液氮研磨损失比较大，对于量小但比较稳定的东西还是常温匀浆比较好。
我们的蛋白核酸提取都是匀浆。
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3楼2010-05-04 13:32:43
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lzhwin

木虫 (正式写手)
那么冻干之后的样品应该怎么保存呢？

回2楼：另外我说的液氮冷冻后-80度保存也是为了保存样品活性啊，RNA不就是这么保存的吗？ 跟冻干保护样品有什么不同呢？

回3楼：RNA肯定是用液氮来提吧？匀浆能处理的样品更多，而且可以自动化。这是液氮研磨没法比的。

我的样品量不是很大，我只是想知道液氮是不是会对一些待测物造成损伤，比如鞘脂

[ Last edited by lzhwin on 2010-5-4 at 15:11 ]
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4楼2010-05-04 15:08:07
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hezhao999

木虫 (正式写手)
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[quote]Originally posted by lzhwin at 2010-05-04 15:08:07:
那么冻干之后的样品应该怎么保存呢？

回2楼：另外我说的液氮冷冻后-80度保存也是为了保存样品活性啊，RNA不就是这么保存的吗？ 跟冻干保护样品有什么不同呢？

冻干的最主要目的是干燥，用途不一样，细胞-80度、液氮下保存后还可以复苏，细胞冻干后就死了。但是酶制剂冻干后可以保持活性，常温下保持跟长时间
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5楼2010-05-05 08:58:32
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lingn

木虫 (正式写手)
★
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我们提RNA不用液氮，加少量TRIZOL，直接匀浆。加TRIZOL之后是不会降解的。我们每次的样品都很少，最多1mg，有的时候100ug都不到，要是液氮研磨，基本是拿不到东西的。
引用回帖:
Originally posted by lzhwin at 2010-05-04 15:08:07:


回3楼：RNA肯定是用液氮来提吧？匀浆能处理的样 ...

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6楼2010-05-05 17:12:31
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