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xiami1943

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[交流] 【求助/交流】请教关于纤维素最适pH的问题已有3人参与

请教高手，最近测纤维素内切酶CMC活力，想确定其最适pH，于是配了从2-8的柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲溶液，以及8-10的甘氨酸-NaOH缓冲液，并且用pH计测定了pH值，可是测出来OD540波动很大，出现了四个峰，参考的酶活测定为86年的经典方法。这是因为我的发酵液里有多个酶，还是缓冲液有问题呢？有经验的高手，请帮忙解答一下

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1楼 2010-04-29 23:39:21

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duanyongzhong

银虫 (正式写手)

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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
scelab(金币+2):欢迎多来交流！:tiger06: 2010-04-30 15:58

缓冲液出问题的可能性较小。实际上测的最适反应ph值一般都会出现几个峰的，倒立的钟型曲线不太常见在实际测定中。考虑测定方法的误差、酶的组分不单一各组分的最适ph值不同和不同ph值情况下底物的溶解性能都有影响。

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2楼2010-04-30 01:18:32

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xiami1943

铁虫 (小有名气)

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引用回帖:

Originally posted by duanyongzhong at 2010-04-30 01:18:32:
缓冲液出问题的可能性较小。实际上测的最适反应ph值一般都会出现几个峰的，倒立的钟型曲线不太常见在实际测定中。考虑测定方法的误差、酶的组分不单一各组分的最适ph值不同和不同ph值情况下底物的溶解性能都有影响。

那么说，别人做的纤维素酶的那种很标准课本上见的曲线，很大可能是他们自己瞎编的了？天呢，我决定纯化下酶，看看有几个酶在里面，谢谢你

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3楼2010-04-30 13:06:52

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