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zhangrun0110

铁虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】感受态细胞如何处理 已有13人参与

我刚接触克隆,感受态细胞用的是DH5α,实验室达不到-70,就放在-40度冰箱了,会不会影响实验效果啊?如果影响的话,该怎么处理一下呢?希望各位大虾帮忙!谢谢!

[ Last edited by zhangrun0110 on 2010-4-28 at 14:01 ]
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gaiyf

金虫 (正式写手)


1949stone(金币+1): 2010-04-28 14:45
问题应当不大
多看文献,多学知识
2楼2010-04-28 14:16:56
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shengwufenzi

金虫 (正式写手)

★ ★
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1949stone(金币+1): 2010-04-28 14:45
短时间内没啥问题的
3楼2010-04-28 14:20:05
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zhangrun0110

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by gaiyf at 2010-04-28 14:16:56:
问题应当不大

谢谢!我还有一个问题,我们买的感受态细胞量挺少的,如果做的样多了,一次就能用完,可不可以培养一下再用?怎么培养?
4楼2010-04-28 14:46:58
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liyong1981

金虫 (正式写手)


★ ★
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plantaqp(金币+1): 2010-04-29 00:57
那要重新做的,划线啊~重新做
5楼2010-04-28 14:50:37
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bestbb2005

金虫 (著名写手)

6楼2010-04-28 14:58:09
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xuelang163

木虫 (正式写手)

时间短的话是没有问题的
暮晓春来迟,先于百花知。岁岁种桃树,开在断肠时。
7楼2010-04-28 14:59:18
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xzx135

铁杆木虫 (正式写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
plantaqp(金币+1): 2010-04-29 00:57
DH5α一般就是用来提质粒的,一般都是实验室划个平板,自己做个感受态,一次做几十个,大家一起用的。具体方法,分子克隆第三版说的很详细了。但是,要是长期用,最好要放在负70的冰箱里。
8楼2010-04-28 15:01:17
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zhangrun0110

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by liyong1981 at 2010-04-28 14:50:37:
那要重新做的,划线啊~重新做

能不能说的具体点?是要重新做感受态细胞吗?我有个想法,不过之前对微生物这块一点不懂,所以想问问可不可以把细胞培养成一个菌群?
9楼2010-04-28 15:04:27
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shengwufenzi

金虫 (正式写手)

★ ★
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plantaqp(金币+1): 2010-04-29 00:58
对于大肠杆菌DH5α,你可以将买的菌种活化一下(挑一菌斑接入约4ml液体LB培养基37度摇床震荡培养过夜),后涂布平板,37度恒温培养至长出适当大小的菌落即可低温保存,以后再用,再挑取此菌一菌斑活化后扩大培养再重新做感受态。
10楼2010-04-28 15:33:41
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