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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 【求助】问几个液相问题。。。请大家帮助下。。。
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magicalkl

木虫 (正式写手)

与君共勉

[交流] 【求助】问几个液相问题。。。请大家帮助下。。。 已有6人参与

如题，刚入手液相不久问几个问题：
1.要测定的组分紫外吸收在240，380比较好，可是240的地方干扰比较大，所以想在380处定量，不过觉得380都快到可见区了，这样有什么不妥吗？
2.在梯度洗脱的时候泵的压力比较大，这对仪器那些地方有影响呢，比如柱子什么的，还有就是这些地方有压力上限什么的吗？谢谢大家帮助！
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1楼 2010-04-27 14:42:22
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asnsygc

金虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
pplover(金币+2):很详细哦！感谢参与！ 2010-04-27 19:33
本人也是新手，我觉得这个没什么关系吧，只要检测器的波长检测范围能达到就可以了吧，UV检测器氘灯适合在190-400nm的范围内检测，要是在400-700nm检测时用钨灯较好。
     压力太大对柱子肯定不好，有的柱子的说明书上会标明柱子的最适宜的工作压力和可承受最大压力的。如果是新柱，小于150bar最好，小于200bar通常是基本的要求。嘿嘿，个人观点，有不对的地方请高人指正！！
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我这个人走的很慢，但我从不后退！！
2楼2010-04-27 15:16:20
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lovefred

银虫 (正式写手)
★
happy169(金币+1):谢谢参与，欢迎常来分析版 2010-04-28 09:26
1、360nm没问题，提醒楼主注意是测含量还是啥？要是测含量，360没问题，要是有关物质，就要考虑下是否适合。楼主说的240测定有干扰，不知道是楼主的方法适不适合？
2、梯度洗脱时的压力大？不知楼主是不是在说压力变化大，这个要看楼主的梯度设置的是不是太急了。。这个压力只要不超过仪器最大耐受的压力（一般都有保护的，超压会自己停的）对仪器没啥伤害，但要是变化太快，基线会不稳。
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3楼2010-04-27 20:12:49
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magicalkl

木虫 (正式写手)

与君共勉
引用回帖:
Originally posted by lovefred at 2010-04-27 20:12:49:
1、360nm没问题，提醒楼主注意是测含量还是啥？要是测含量，360没问题，要是有关物质，就要考虑下是否适合。楼主说的240测定有干扰，不知道是楼主的方法适不适合？
2、梯度洗脱时的压力大？不知楼主是不是在说压 ...

谢谢楼上的解答！
1.我是测含量的，240的干扰主要是组分溶剂的干扰
2.洗脱线性在25分钟内从磷酸盐95%甲醇5%————甲醇100%，基线到是稳的。。。就是压力到200bar左右。
3.不知到我这么个梯度最后冲柱子应该怎么样做，朋友给点意见啊！
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4楼2010-04-28 08:29:31
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luomuwuhen

金虫 (著名写手)
★ ★
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铁甲骑兵(金币+1):欢迎解答。 2010-05-01 06:11
引用回帖:
Originally posted by magicalkl at 2010-04-28 08:29:31:

谢谢楼上的解答！
1.我是测含量的，240的干扰主要是组分溶剂的干扰
2.洗脱线性在25分钟内从磷酸盐95%甲醇5%————甲醇100%，基线到是稳的。。。就是压力到200bar左右。
3.不知到我这么个梯度最后冲柱子应该 ...

1.如果你的成分在240和360都是最大吸收的话，选360没问题。溶剂干扰，可以选择用流动相溶解样品
2.磷酸盐的浓度不要太大，0.01M-0.05M比较合适
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药物合成
5楼2010-04-28 10:26:58
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lovefred

银虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
铁甲骑兵(金币+1):欢迎解答。你们为啥不用MPa呢？ 2010-05-01 06:11
引用回帖:
Originally posted by magicalkl at 2010-04-28 08:29:31:

谢谢楼上的解答！
1.我是测含量的，240的干扰主要是组分溶剂的干扰
2.洗脱线性在25分钟内从磷酸盐95%甲醇5%————甲醇100%，基线到是稳的。。。就是压力到200bar左右。
3.不知到我这么个梯度最后冲柱子应该 ...

1.那就换360nm好了
2.甲醇和水相的混合，本来压力就会较高。。看你柱子内径和长度。。200bar大概在3000psi左右。。没问题的。。
3.用5%～10%的甲醇冲洗就可以。。我一般直接用纯水。。
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6楼2010-04-28 10:40:02
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mindycheng

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
铁甲骑兵(金币+1):感谢回复。 2010-05-01 06:11
引用回帖:
Originally posted by lovefred at 2010-04-28 10:40:02:

1.那就换360nm好了
2.甲醇和水相的混合，本来压力就会较高。。看你柱子内径和长度。。200bar大概在3000psi左右。。没问题的。。
3.用5%～10%的甲醇冲洗就可以。。我一般直接用纯水。。

其实压力的话不单要看柱子的耐受，还要看柱接口的耐受，peek头的话我记得就只能200bar，不锈钢头可以更高
直接用纯水对柱子不太好，少加点甲醇更好
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7楼2010-04-30 23:41:27
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cindyccy1989

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
额。。。梯度清洗时甲醇：水=50:50的时候压力是最大的。。。
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8楼2012-05-21 09:18:02
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