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wsc0451

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】有没有人做过用水煮法提取DNA的啊,望赐教 已有19人参与

本人提细菌DNA基因组,由于对DNA纯度的要求不高,故想通过经济简便的方法提取(之前用试剂盒提,但比较贵),但经过网上找的水煮法流程试验了两次,都没成功(跑电泳都没跑出来),不知道这个方法到底可行不可行。。。

我是这么做的:菌液离心后去掉清液,EP管底部有菌体,加灭菌ddH2O(600微升左右吧),然后沸水浴蒸煮10分钟,再离心,取上清液。。。。理论上DNA就应该溶于水中,但结果。。。悲剧啊。。望赐教~~最近导师催的紧,望各位虫友帮帮忙
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立意要高,做事要实
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wsc0451

银虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by yzuxhq368 at 2010-04-27 20:21:10:
1、水加得太多,200-400微升足够了
2、水煮后冰浴十分钟
3、一般只适合革兰氏阴性菌
我们只用于做PCR模板

最近又试了一次。。跑了电泳后。。DNA没出来。RNA倒出来了。。尴尬
立意要高,做事要实
17楼2010-04-28 16:39:14
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查看全部 22 个回答

郑B.CoA

金虫 (正式写手)

话说蛋白质也溶于水吧..
2楼2010-04-26 21:05:12
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Science298

铜虫 (正式写手)

wsc0451(金币+1): 2010-04-26 21:59
用5%的氢氧化钠煮
3楼2010-04-26 21:35:20
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wwllkkhh

金虫 (小有名气)

wsc0451(金币+1): 2010-04-26 22:00
可以的,不过要加氯仿、异戊醇、异丙醇进行洗脱才能得到纯净的DNA
牛~逼~哄~哄
4楼2010-04-26 21:49:27
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