应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】菌液PCR和酶切的结果不符
192/2返回列表上一页12
查看: 1949  |  回复: 18
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

liuwei78

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by xiangquanju at 2010-04-22 13:29:25:
还有你的载体上是否也有这个酶切位点呢~~

载体上有这个酶切位点，不过引物设计时没有引入酶切位点，是直接TA连接的
赞一下 回复此楼
11楼2010-04-23 09:36:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wlihust

铜虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
可能是假阳性 也有可能是酶连时没有连上~~
自己做做对照试验，验证一下
赞一下(1人) 回复此楼
12楼2010-04-23 11:08:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiangquanju

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by liuwei78 at 2010-04-23 09:36:26:


载体上有这个酶切位点，不过引物设计时没有引入酶切位点，是直接TA连接的

T载体上是将多克隆位点去掉了的，不知道你是用的载体上的什么酶切位点？
赞一下(1人) 回复此楼
13楼2010-04-23 11:15:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liyong1981

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
有时候有的问题确实很奇怪，我觉得，应该推到从来，载体换个，
赞一下(1人) 回复此楼
14楼2010-04-23 14:34:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)
如果你插入片段的时候用单酶切，那么插入片段后就变成2个酶切位点。
赞一下 回复此楼
15楼2010-04-23 15:46:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liuwei78

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by xiangquanju at 2010-04-23 11:15:38:

T载体上是将多克隆位点去掉了的，不知道你是用的载体上的什么酶切位点？

用的是pMD19-T,上面有挺多酶切位点的
赞一下 回复此楼
16楼2010-04-23 15:49:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liuwei78

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by jurkat.1640 at 2010-04-23 15:46:16:
如果你插入片段的时候用单酶切，那么插入片段后就变成2个酶切位点。

插入片段是TA连接，验证时用的是单酶切
赞一下 回复此楼
17楼2010-04-23 15:50:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zjzz

木虫 (正式写手)

在通往变态的坦途上
遇到奇怪的地方，我通常重做一次
50%的时候能搞定
赞一下 回复此楼
终于熬成木虫了……
18楼2010-04-24 07:21:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

stliimoon

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by liuwei78 at 2010-04-23 09:34:19:


我也怀疑是假阳性，不过为什么连载体的大小都没有P出来呢

你可以试一下用载体的启动子端的引物和载体末端的引物试着P一下，与未连接的对照组对比一下，参看长度，看是是否真的连上了
赞一下(1人) 回复此楼
19楼2010-04-24 09:59:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 liuwei78 的主题更新
192/2返回列表上一页12
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 关于如何从代码看上不上会 +12 且听虎啸 2026-07-09 15/750 2026-07-10 08:12 by jaasxulu
[教师之家] 售T0P一区SCI文章，我:8O5.51.O.54,科目齐全,可＋急 +3 68gx6bh3ei 2026-07-09 3/150 2026-07-10 06:53 by pbuc7it0i8
[硕博家园] 售T0P一区SCI文章，我:8O5.51.O.54,科目齐全,可＋急 +3 68gx6bh3ei 2026-07-09 3/150 2026-07-10 06:33 by pbuc7it0i8
[硕博家园] 售T0P一区SCI文章，我:8O5.51.O.54,科目齐全,可＋急 +3 ph7bxbho8f 2026-07-09 3/150 2026-07-10 05:53 by j4frgf6zcw
[教师之家] 售T0P一区SCI文章，我:8O5.51.O.54,科目齐全,可＋急 +3 al9t2f50x3 2026-07-09 4/200 2026-07-10 05:33 by j4frgf6zcw
[考研] 售T0P一区SCI文章，我:8O5.51.O.54,科目齐全,可＋急 +4 al9t2f50x3 2026-07-09 4/200 2026-07-10 05:33 by j4frgf6zcw
[基金申请] b口会评 +6 当空照 2026-07-08 6/300 2026-07-09 20:49 by tonyliu0401
[基金申请] 信息学部会评时间 +3 xuel2011 2026-07-06 3/150 2026-07-09 19:05 by mollyzhang_2003
[基金申请] 祈祷青基必中 50+3 hadengry 2026-07-09 9/450 2026-07-09 17:37 by 文杰猪猪
[论文投稿] MSER送审了还被拒稿 +3 S778950906 2026-07-08 5/250 2026-07-09 15:46 by S778950906
[有机交流] 硝基还原 20+3 暮年飞雪 2026-07-07 5/250 2026-07-09 13:30 by tfang
[基金申请] 化学口会评？应用基础研究和基础研究，希望能分开 +3 Tide man 2026-07-08 3/150 2026-07-09 11:36 by dede5556
[基金申请] 今年E04面上 +15 布布和一二 2026-07-05 21/1050 2026-07-09 10:25 by 学员fOzRO9
[硕博家园] 大龄残疾硕士的一点执念 +14 3776737374 2026-07-06 22/1100 2026-07-09 06:07 by lovechizi
[基金申请] 生命口会评 +4 wuke100666 2026-07-07 4/200 2026-07-08 16:38 by 逍遥不够自在
[教师之家] 网络举报学术不端成为了男女之间情杀的手段了，真荒唐。。。 +3 zju2000 2026-07-04 3/150 2026-07-07 21:00 by hyx552200
[有机交流] Suzuki偶联中硼酸酯原料掉下的硼酸酯是否可以自身偶联，生成B2Pin2杂质 500+3 天下大同 2026-07-06 3/150 2026-07-07 10:31 by martyr_oyx
[论文投稿] 刑法学论文投稿求助 +3 高源678 2026-07-04 5/250 2026-07-06 12:20 by 平天尺
[论文投稿] Journal of Environmental Chemical Engineering +3 雪花天涯 2026-07-05 3/150 2026-07-06 09:00 by bobvan
[基金申请] 最后一年，祈求好运 +3 pyw1992 2026-07-06 3/150 2026-07-06 08:53 by 苏_frp
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭