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yf-deng金虫 (正式写手)
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[交流]
【求助/交流】TaKaRa PrimeScript Reverse Transcriptase--如何组装5RACE试剂盒? 已有3人参与
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大家好!最近我要做5RACE,请问大家有没有用过TaKaRa的PrimeScript Reverse Transcriptase(200 U/μl)反转录酶,刚问了销售人员说该酶可单独买做5RACE,但还有以下疑问: 1、说明书中并没有讲该酶有反转录至5端加一段引物的功能,另外所给的反转录体系中也没有出现5端加尾引物。 2、如果该酶有5端加尾活性,自己单独配制加尾引物的话碱基个数是否有限制?可否直接用Clotech的5 adaptor 5'–CTAATACGACTCACTATAGGGC–3'?哪位战友自己配过引物的可否分享?谢谢! 3、是不是只要合成一个加尾引物即可(就是加尾引物与后来做RACE的引物一样)? 望用过该酶的战友分享一下经验,不在老板实验室了,做实验得尽可能节省经费,望大家赐教!祝大家实验顺利! |
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