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wangleinhcll

[交流] 【求助】请教:注射用水溶性维生素检测问题? 已有2人参与

请教:注射用水溶性维生素中关于烟酰胺、等5项的液相检测方法其标准为烟酰胺、盐酸吡哆辛、硝酸硫胺、泛酸钠、维生素C钠和核黄素磷酸钠 照高效液相色谱法(中国药典1995年版二部附录Ⅴ D)测定。
  色谱条件与系统适用性试验 用氨基键合多孔硅胶为填料,以(0.02mol/L)磷酸二氢钾溶液-乙腈(27:73),用10%盐酸溶液调节pH为5.3的溶液为流动相,流速为1.5ml/min,检测波长:烟酰胺、盐酸吡哆辛、硝酸硫胺、泛酸钠、维生素C钠为214nm;核黄素磷酸钠用萤光检测λEX=445nm、λEM=520nm。各组分的分离度应符合要求。
  对照品溶液的制备 (1)取烟酰胺对照品约150mg、硝酸硫胺对照品约12mg、盐酸吡哆辛对照品约18mg、泛酸钠对照品约62mg,分别精密称量置50ml量瓶中,加水溶解并稀释至刻度摇匀,精密量取2ml置50ml量瓶中,用流动相稀释至刻度,摇匀,即为对照品溶液(Ⅰ),此溶液置暗处充氮气于零下20℃可保存1 个月。
(2)取维生素C钠对照品约425mg、核黄素磷酸钠对照品约19mg,精密称定,置50ml量瓶中加水溶解并稀释至刻度摇匀,精密量取 2ml置50ml量瓶中,用流动相稀释至刻度,摇匀即为对照品溶液(Ⅱ),此溶液必须临用新鲜配制,并于零下20℃保存,用前放置至室
温。
  等容混合对照品溶液(Ⅰ)和对照品溶液(Ⅱ)即为对照品溶液。
  供试品溶液的制备 取装量差异项下的内容物约2瓶重量,精密称定,置 100ml量瓶中,加水溶解并稀释至刻度,摇匀,精密量取15ml置200ml量瓶中,用流动相稀释至刻度。
  测定法 取对照品溶液和供试品溶液各10μl,交替注入液相色谱仪,测定,用外标法计算各组分含量,即得。
目前存在问题用紫外检测的分不开5种组分,大家有什么好办法,谢谢
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wangleinhcll

引用回帖:
Originally posted by 429649057 at 2010-04-21 09:50:56:
1、为什么要用氨基柱呢?
2、试过调调流动相的比例吗?

增大乙腈比例已经试过用C18的柱子也试过都不能分开,现在等250柱子回来再试试,大家有没有什么别的流动相可以试试的
4楼2010-04-23 13:40:09
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wangleinhcll

真的没人吗?等很久了
2楼2010-04-21 00:15:34
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429649057

木虫 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
笨笨猪0608(金币+1):谢谢回帖交流 2010-04-21 10:50
1、为什么要用氨基柱呢?
2、试过调调流动相的比例吗?
3楼2010-04-21 09:50:56
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