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wzw025

铜虫 (初入文坛)

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[交流] 【求助/交流】ELISA失败的原因已有4人参与

最近正在建立检测猪肺炎支原体抗原与抗体的ELISA方法，可是总是失败，请教各位专家真心指点一下，ELISA失败主要有哪些原因呢？需要从哪些方面着手突破呢？谢谢！不希望有灌水哦，(*^__^*)

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1楼 2010-04-20 00:03:30

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liyong1981

金虫 (正式写手)

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你什么都没说，让人怎么帮助你?受不了
使你失败的原因有10的N次方计，请说你怎么做的，加上自己的分析，谢谢

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2楼2010-04-20 16:32:55

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xfq1212

铜虫 (初入文坛)

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★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+2):感谢交流~~ 2010-04-21 18:11

ELISA的试剂加量要准，如果每个孔内加的一抗、二抗试剂的量不一样结果变化很大，并且一、二抗的浓度也很重要，还有终止也最好用新近配的，否则终止后测定时数据会随时间的延长变的很厉害

[ Last edited by xfq1212 on 2010-4-20 at 20:31 ]

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3楼2010-04-20 20:30:10

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1110rainjob

铜虫 (小有名气)

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原因很多，希望你把结果发上来大家交流一下

★ ★
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lstt09nk(金币+1):感谢交流~~ 2010-04-21 18:11

普遍的几个关键点是：包被，首先确定是不是用来检测ELISA的酶标板，其次包被液的PH值是不是碱性的；洗涤时，甩板和洗涤都应干净彻底，否则易出现本底；加抗体时，抗体的用量很重要，最好先设梯度，选择适宜的浓度。在筛选抗原抗体适宜浓度时，可以借鉴“棋盘法”，这是很经典的方法，在网上很容易搜到。希望实验顺利！

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4楼2010-04-20 20:52:34

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