24小时热门版块排行榜    

查看: 2709  |  回复: 11
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

greatsaint

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】荧光定量pcr 已有5人参与

请问哪位能告知荧光定量PCR的时候做NTC的目的是什么?我的NTC怎么会总是污染呢?我的E=264%是怎么原因呢?怎么会这么大呢?谢谢!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nmhsd

木虫 (正式写手)

如果计算推导等均不看,实验原理也不去看。还做什么实验?
11楼2013-05-02 11:16:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

yujiaping1

木虫 (著名写手)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
greatsaint(金币+1): 2010-04-19 21:14
greatsaint(金币+1):很好,谢谢 2010-04-19 21:15
amisking(金币+2): 2010-04-19 21:19
NTC和阴性对照不完全一样,拿病毒检测为例,阴性对照是指以非病毒感染样本为模板的PCR扩增,这个样本可以排除检测的不准确性,而NTC是指无模板对照,是防止操作、系统、药品等的污染,说明白这个道理,楼主应该知道做NTC的目的了吧。
我以前做病毒检测的定量PCR,发现NTC确实很容易污染,但现在做基因检测,基本不容易观测到污染现象了,这主要可能是由于质粒的气溶胶和水污染造成的,建议你PCR水常用常换,灭菌后分装,避免经常开瓶,而且要在超净台中制混合样,在超净台外加质粒、模板等
2楼2010-04-19 20:54:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

greatsaint

银虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by yujiaping1 at 2010-04-19 20:54:54:
NTC和阴性对照不完全一样,拿病毒检测为例,阴性对照是指以非病毒感染样本为模板的PCR扩增,这个样本可以排除检测的不准确性,而NTC是指无模板对照,是防止操作、系统、药品等的污染,说明白这个道理,楼主应该知 ...

请问,我的扩增效率达到了264%是什么原因呢?怎么会这么大呢?谢谢
3楼2010-04-19 21:45:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

石头8832

铜虫 (小有名气)


scelab(金币+1):欢迎多来交流!:tiger06: 2010-04-19 22:58
greatsaint(金币+1): 2010-04-20 08:58
你的目的基因可能是多拷贝的
4楼2010-04-19 22:02:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的? +17 爱看书的可乐 2026-08-26 19/950 2026-08-30 22:24 by xiangy672
[基金申请] 能否申诉? +4 echo8914667 2026-08-30 5/250 2026-08-30 21:11 by echo8914667
[基金申请] 为什么到现在没收到通知? +5 tannykie 2026-08-29 5/250 2026-08-30 21:05 by purplejack
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +7 德尚中行 2026-08-27 8/400 2026-08-30 20:52 by purplejack
[考博] 找导师 +6 yuanjiabao 2026-08-29 7/350 2026-08-30 14:40 by 生科新手
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见(F口面上) +6 gdd2018 2026-08-28 11/550 2026-08-30 08:58 by 超级无敌华子
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗? +4 349506619 2026-08-28 4/200 2026-08-29 22:41 by alongwaytogo
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +4 bud_bud 2026-08-27 7/350 2026-08-29 07:23 by foolishmani
[基金申请] 系统查不到 +11 董八千 2026-08-26 11/550 2026-08-28 18:06 by Leogzhya
[基金申请] 基金不中,共勉 +11 eulota 2026-08-26 11/550 2026-08-28 14:22 by 火星超人xi
[基金申请] 面上合作单位盖章 +5 ssyjh 2026-08-27 5/250 2026-08-27 20:50 by gdfollow
[基金申请] 基金未中,这种答复是模板吗? +5 zhaosm1982 2026-08-27 6/300 2026-08-27 16:00 by lfy8008
[基金申请] 看板上这么多中的,有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件,有关系吗? +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 国际合作可查了,中了面上 (EPI+1)(金币+50) +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 今天务委会开完了,明天出结果吗 +19 angus9576 2026-08-25 23/1150 2026-08-26 10:03 by zp519
[基金申请] 某些机构,以效率低为荣,以效率低作为存在感 +9 yuleib84 2026-08-25 10/500 2026-08-25 17:14 by alexon
信息提示
请填处理意见