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feiye2214

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】如何克隆未知序列的β-actin 的启动子已有5人参与

我的目的是克隆头足类(我的研究对象就是一种乌贼)的β-actin 的启动子,构建表达性强的重组载体质粒。
    目前能查到很多的物种的β-actin 的启动子的序列,但是保守性不行,而且没有头足类的相应序列。所以我认为无法用简单的PCR操作来设计引物并克隆该启动子。
    各位大侠给我指点一二啊。要么克隆β-actin 的启动子,要么更换更好的更易获取的启动子。谢谢大家帮助啦
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feiye2214

木虫 (正式写手)

walking试剂盒是用来tailPCR的么?那确定启动子核心区域没有什么通用的方法不?主要麻烦在什么地方?
引用回帖:
Originally posted by 月月大可 at 2010-04-19 16:42:22:
先搞定β-actin 的序列,然后买个walking的试剂盒,向上游走。拿到上游的序列后要鉴定启动子的核心区域是一件麻烦的工作。

6楼2010-04-19 17:54:15
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