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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】大家一般用什么方法浓缩酶液或者蛋白质呢？
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melody-kh

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】大家一般用什么方法浓缩酶液或者蛋白质呢？已有8人参与

如题，大家一般用什么方法浓缩蛋白质呢？纯化后的酶液体积很大，用透析袋和聚乙二醇20000浓缩后效果不是很理想
有没有用过冻干机浓缩的，用冻干机会对蛋白质活性或者酶活有影响吗？
还有其他比较好的方法吗？
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1楼2010-04-18 20:57:37
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月月大可

木虫 (著名写手)
★
melody-kh(金币+3):谢谢，看来不能用Millipore的超滤管，没有水平离心机，~~~~(>_<)~~~~ 2010-04-20 12:28
1949stone(金币+1): 2010-04-20 19:29
15ml的需要使用水平离心机，为了稳定蛋白性质最好在4度下，当然你的酶要是超级稳定可以尝试室温浓缩。
离心的转速要严格控制，不能过高。否则会是蛋白漏下或者造成超滤管的损坏。
我这里使用一般不超过3500rpm，具体的离心力我没有留意过。
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11楼2010-04-20 12:09:34
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gastrodia

金虫 (正式写手)
★
scelab(金币+1):欢迎多来交流！:tiger06: 2010-04-19 00:16
melody-kh(金币+3):O(∩_∩)O谢谢 2010-04-19 09:09
超滤，就是用滤膜滤，水分等小分子可以透过，分子量大于半透膜的不能透过
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2楼2010-04-18 23:02:47
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wxd2006

★
1949stone(金币+1): 2010-04-20 15:58
超滤，就是用滤膜滤，水分等小分子可以透过，分子量大于半透膜的不能透过
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3楼2010-04-19 08:54:00
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melody-kh

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by gastrodia at 2010-04-18 23:02:47:
超滤，就是用滤膜滤，水分等小分子可以透过，分子量大于半透膜的不能透过

是用的哪种超滤膜呢？生产厂家和价格 分别是多少呢？
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4楼2010-04-19 09:10:13
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