24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
查看: 964  |  回复: 10
当前主题已经存档。
【有奖交流】积极回复本帖子,参与交流,就有机会分得作者 jiangkuo0520 的 1 个金币
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

jiangkuo0520

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】PCR引物设计求助!!!已有5人参与

公司合成的2条引物 第一条 22BP  TM:51  第二条 53BP  TM:69
第一条引物我在PP5上测定时 TM是61.3
想进行PCR程序设定,不知道该怎么设定退火温度?谢谢!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jiangkuo0520

金虫 (正式写手)

★ ★
amisking(金币+2): 2010-04-18 20:42
引用回帖:
Originally posted by yujiaping1 at 2010-04-18 12:57:33:
第二条引物怎么会这么长?有问题吧 。
如楼上所说,退火温度差距也太大了,最好是上下不超过两度

第二条引物之所以长是因为,我想通过PCR的方式在原有片段上延伸一段
5楼2010-04-18 14:40:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

klosexs1987

金虫 (小有名气)


1949stone(金币+1): 2010-04-18 14:24
两条引物的解连温度相差太大了。。一般设计的两条引物解连温度相差应小于5度。。建议重新设计。。
2楼2010-04-18 12:55:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yujiaping1

木虫 (著名写手)


amisking(金币+1): 2010-04-18 13:07
第二条引物怎么会这么长?有问题吧 。
如楼上所说,退火温度差距也太大了,最好是上下不超过两度
3楼2010-04-18 12:57:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cato8163

银虫 (正式写手)

做个梯度吧,在60度,上下10度。
4楼2010-04-18 12:58:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复(可上传附件)
信息提示
请填处理意见