24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 968  |  回复: 4
当前主题已经存档。

yanjvfen

银虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】如何将2条单链DNA合成1条双链DNA 已有4人参与

我在生工合成了2条单链DNA(分别装于2个EP管内,并且它们部分碱基互补),如何把它们合成1条双链DNA?本人第一次做分子实验,向各位大侠请教下!谢谢啦
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

每天进步一点点
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yujiaping1

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
95度,5 min;
65度,10 min;
37度,10 min;
降至室温保存于-20度。
2楼2010-04-15 21:39:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yanjvfen

银虫 (初入文坛)

要加反应缓冲液吗?
每天进步一点点
3楼2010-04-15 21:56:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

段家一凡

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
这要看你的部分碱基互补的序列有多长,再设定退火温度。一般就是一个不加引物的PCR过程。最好用pfu酶进行聚合,TAQ可能出错。像二楼的可能以为你的是完全互补的两条单链,所以给你的方法是错的。
4楼2010-04-16 00:33:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

spiderboy

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
楼主的意思是说用那两条单链合成一条完整的双链吗?

能不能用PCR的方法就得看你的两条单链互补区域是不是在3‘末端了,是的话可以,不是的话你还得重新再合两条引物来扩全长。。

如果你的两条单链是完全互补的话,要杂交退火,我们一般是这样操作的:两条单链等量混在一起,PCR上95度3分钟,然后直接关机器,让机器自然缓慢降温,来杂交退火
5楼2010-04-16 08:25:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yanjvfen 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 296求调剂 +4 sdhu 2026-04-02 4/200 2026-04-02 21:29 by baoball
[考研] 342求调剂 +16 Mary Keen 2026-03-28 17/850 2026-04-02 21:14 by 690616278
[考研] 一志愿上海海洋大学083200食品学硕,求调剂,接受其他专业 +6 what张 2026-04-01 7/350 2026-04-02 16:48 by zzsw+
[考研] 一志愿北京科技大学材料学硕328分求调剂 +6 1段时间 2026-03-31 7/350 2026-04-02 13:57 by 3041
[考研] 一志愿北京理工大学本科211材料工程294求调剂 +8 mikasa的围巾 2026-03-28 9/450 2026-04-02 12:09 by ms629
[考研] 085601 材料工程 313分 求调剂 +7 Ong3 2026-03-27 7/350 2026-04-02 11:29 by 3041
[考研] 0710生物学336分求调剂 +3 kiyy 2026-04-01 3/150 2026-04-02 10:54 by w虫虫123
[考研] 085600,材料与化工321分,求调剂 +13 大馋小子 2026-03-27 13/650 2026-04-02 10:48 by sanrepian
[考研] 一志愿北交大材料工程总分358 +8 cs0106 2026-04-01 9/450 2026-04-02 10:36 by 不吃魚的貓
[考研] 266求调剂 +4 学员97LZgn 2026-04-02 4/200 2026-04-02 09:52 by yulian1987
[考研] 11408 321分求调剂 +3 huchun12138 2026-03-30 4/200 2026-04-01 22:48 by guanxin1001
[考研] 279求调剂 +7 莫xiao 2026-04-01 7/350 2026-04-01 22:05 by 客尔美德
[考研] 284求调剂 +12 小熊~~ 2026-03-31 12/600 2026-04-01 20:23 by 花??
[考研] 材料调剂 +11 一样YWY 2026-03-31 11/550 2026-04-01 11:35 by wangjy2002
[考研] 289求调剂 +7 BrightLL 2026-03-29 7/350 2026-03-31 22:05 by 544594351
[考研] 一志愿华东师范大学有机化学专业,初试351分,复试被刷求调剂! +9 真名有冰 2026-03-29 10/500 2026-03-31 18:01 by xhai2011
[考研] 334求调剂 +7 Trying] 2026-03-31 7/350 2026-03-31 12:33 by 无际的草原
[考研] 105500药学求调剂,一志愿山东大学药学,348分 +3 gr哈哈哈 2026-03-28 3/150 2026-03-30 18:56 by 源_2020
[考研] 2026年华南师范大学欢迎化学,化工,生物,生医工等专业优秀学子加入! +3 llss0711 2026-03-28 6/300 2026-03-29 10:26 by llss0711
[考研] 一志愿吉大071010,316分求调剂 +3 xgbiknn 2026-03-27 3/150 2026-03-27 10:36 by guoweigw
信息提示
请填处理意见