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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 【讨论】问问大家hplc的问题。
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longquan8297

铁杆木虫 (著名写手)

木虫的称号也得到了。为什么 ...

[交流] 【讨论】问问大家hplc的问题。 已有6人参与

我的实验在测定样品中，改变了流动相比例。以前是100%的水，然后改成50%的水和50%的乙腈，
那么是不是检测图上是不是会重新多出个峰。波长是200nm。请大家讨论下。
会给大家加金币。
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流氓不可怕，就怕流氓没文化~~
1楼 2010-04-15 18:16:03
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lovefred

银虫 (正式写手)
longquan8297(金币+1):不是常规的改变流动相，是萃取。 2010-04-15 21:10
100%水相改为50%乙腈。。这变动也太大了吧？要是多出来峰。。那以前你做的结果还要相信么?
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2楼2010-04-15 19:05:36
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lovefred

银虫 (正式写手)
还是具体说说吧。。不咋明白楼主要表达啥意思。。另外。。欢迎来到小木虫1年。。
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3楼2010-04-15 21:23:27
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sunbr

银虫 (小有名气)
逐渐增加乙腈的比例，这个幅度有点大。
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4楼2010-04-15 21:27:11
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dangshuiyun

铜虫 (初入文坛)
longquan8297(金币+5): 2010-04-16 09:55
多出来个峰一般是不会的，你这样改动了流动相的比例，可能会让峰的形状更尖锐，更好。

但如果你的样品里面有杂质，有可能会多出来一个杂质峰。
1. 原来在100%水的时候杂质留在柱子中洗脱不出来，变换了流动相以后，杂质和目标化合物都被洗脱出来了，多出了一个杂质峰。
2. 原来在100%水的时候杂志和目标化合物同时被洗脱出来，变换了流动相以后，杂质的化学结构比较特殊，和目标化合物分离开来，多出了一个杂质峰。
第二种情况在反相液相中比较少见，
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5楼2010-04-15 22:44:10
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luomuwuhen

金虫 (著名写手)
longquan8297(金币+1):谢谢 2010-04-16 09:58
楼主很有意思，如果之前用100%的水相测样品，其中的成分都系脱出来了的话，换成50%的乙腈应该也能完全系脱出来，只不过分离度就不能保证了，可能出现峰叠加的现象，峰个数和用水做流动相可能会减少
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药物合成
6楼2010-04-16 09:30:56
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longquan8297

铁杆木虫 (著名写手)

木虫的称号也得到了。为什么 ...
其实我也感觉可能不会出现峰，主要是前面出现一峰，估计应该是溶剂峰吧。我样品用甲醇配的，
甲醇在183nm处有紫外吸收的。估计是它的峰。改变流动相是不会出现峰的。个人感觉。
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流氓不可怕，就怕流氓没文化~~
7楼2010-04-16 09:57:43
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luomuwuhen

金虫 (著名写手)
longquan8297(金币+2):说的很有道理，我试过了，是有峰。呵呵。 2010-04-16 10:41
引用回帖:
Originally posted by longquan8297 at 2010-04-16 09:57:43:
其实我也感觉可能不会出现峰，主要是前面出现一峰，估计应该是溶剂峰吧。我样品用甲醇配的，
甲醇在183nm处有紫外吸收的。估计是它的峰。改变流动相是不会出现峰的。个人感觉。

如果感觉是溶剂峰，楼主可以把溶剂打一针看看出峰情况，或者楼主可以换成流动相溶解样品。甲醇在200-250之间都有吸收的。
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药物合成
8楼2010-04-16 10:28:36
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lhx106

银虫 (小有名气)
longquan8297(金币+1): 2010-07-07 16:05:28
楼主说得好迷糊，我认为可能分离度有问题
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9楼2010-04-16 11:04:42
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