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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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longquan8297

铁杆木虫 (著名写手)

木虫的称号也得到了。为什么 ...

[交流] 【讨论】问问大家hplc的问题。 已有6人参与

我的实验在测定样品中,改变了流动相比例。以前是100%的水,然后改成50%的水和50%的乙腈,
那么是不是检测图上是不是会重新多出个峰。波长是200nm。请大家讨论下。
会给大家加金币。
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流氓不可怕,就怕流氓没文化~~
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lovefred

银虫 (正式写手)

longquan8297(金币+1):不是常规的改变流动相,是萃取。 2010-04-15 21:10
100%水相改为50%乙腈。。这变动也太大了吧?要是多出来峰。。那以前你做的结果还要相信么?
2楼2010-04-15 19:05:36
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lovefred

银虫 (正式写手)

还是具体说说吧。。不咋明白楼主要表达啥意思。。另外。。欢迎来到小木虫1年。。
3楼2010-04-15 21:23:27
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sunbr

银虫 (小有名气)

逐渐增加乙腈的比例,这个幅度有点大。
4楼2010-04-15 21:27:11
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dangshuiyun

铜虫 (初入文坛)

longquan8297(金币+5): 2010-04-16 09:55
多出来个峰一般是不会的,你这样改动了流动相的比例,可能会让峰的形状更尖锐,更好。

但如果你的样品里面有杂质,有可能会多出来一个杂质峰。
1. 原来在100%水的时候杂质留在柱子中洗脱不出来,变换了流动相以后,杂质和目标化合物都被洗脱出来了,多出了一个杂质峰。
2. 原来在100%水的时候杂志和目标化合物同时被洗脱出来,变换了流动相以后,杂质的化学结构比较特殊,和目标化合物分离开来,多出了一个杂质峰。
第二种情况在反相液相中比较少见,
5楼2010-04-15 22:44:10
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luomuwuhen

金虫 (著名写手)

longquan8297(金币+1):谢谢 2010-04-16 09:58
楼主很有意思,如果之前用100%的水相测样品,其中的成分都系脱出来了的话,换成50%的乙腈应该也能完全系脱出来,只不过分离度就不能保证了,可能出现峰叠加的现象,峰个数和用水做流动相可能会减少
药物合成
6楼2010-04-16 09:30:56
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longquan8297

铁杆木虫 (著名写手)

木虫的称号也得到了。为什么 ...

其实我也感觉可能不会出现峰,主要是前面出现一峰,估计应该是溶剂峰吧。我样品用甲醇配的,
甲醇在183nm处有紫外吸收的。估计是它的峰。改变流动相是不会出现峰的。个人感觉。
流氓不可怕,就怕流氓没文化~~
7楼2010-04-16 09:57:43
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luomuwuhen

金虫 (著名写手)

longquan8297(金币+2):说的很有道理,我试过了,是有峰。呵呵。 2010-04-16 10:41
引用回帖:
Originally posted by longquan8297 at 2010-04-16 09:57:43:
其实我也感觉可能不会出现峰,主要是前面出现一峰,估计应该是溶剂峰吧。我样品用甲醇配的,
甲醇在183nm处有紫外吸收的。估计是它的峰。改变流动相是不会出现峰的。个人感觉。

如果感觉是溶剂峰,楼主可以把溶剂打一针看看出峰情况,或者楼主可以换成流动相溶解样品。甲醇在200-250之间都有吸收的。
药物合成
8楼2010-04-16 10:28:36
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lhx106

银虫 (小有名气)

longquan8297(金币+1): 2010-07-07 16:05:28
楼主说得好迷糊,我认为可能分离度有问题
9楼2010-04-16 11:04:42
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