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cqyniu

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】5‘RACE求助 已有5人参与

各位好!我是按照clontech公司的5’RACE试剂盒做的一种淡水藻基因的5'RACE ,但是我已经做了半年了,有时候也会出现条带,测序结果都不对,有时候就是弥散的。请各位成功的人士帮帮我,谢谢了!
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liyong1981

金虫 (正式写手)


★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
1949stone(金币+2): 2010-04-15 18:54
5端的很那做的,帽子很容易降解,你在引物上多下工夫
2楼2010-04-15 16:10:08
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cqyniu

金虫 (小有名气)

已经用十种引物试了,还是不行,你是用的clotech试剂盒做的吗?还是其他的方法?
3楼2010-04-15 16:20:53
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liyong1981

金虫 (正式写手)


★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
1949stone(金币+1): 2010-04-15 18:54
我是原始的方法,哈哈,我说了你可以做PCR-WALKING~往5端延伸,5RACE不好做,要有耐心,
4楼2010-04-15 16:28:33
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won7

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我也用liyong1981那样的方法,每次可以延伸400bp左右,要耐心哦。
5楼2010-04-15 17:58:09
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muchongchong838

禁虫 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
1949stone(金币+2): 2010-04-15 18:54
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6楼2010-04-15 18:44:41
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yujiaping1

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
你做过巢式PCR了吗?clontech的说明书上有介绍的,巢式的效果相当理想,如果巢式可出带,基本上和目的大小差不多的条带,测序肯定就对了

可以加我QQ124759083,咱们讨论一下
7楼2010-04-15 21:52:41
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muchongchong838

禁虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
本帖内容被屏蔽

8楼2010-04-15 22:16:42
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liyong1981

金虫 (正式写手)


不用试剂盒,也可以啊,你设计好引物一样的~祝你成功
9楼2010-04-16 08:54:43
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