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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】5‘RACE求助
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cqyniu

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】5‘RACE求助 已有5人参与

各位好！我是按照clontech公司的5’RACE试剂盒做的一种淡水藻基因的5'RACE ,但是我已经做了半年了，有时候也会出现条带，测序结果都不对，有时候就是弥散的。请各位成功的人士帮帮我，谢谢了！
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1楼 2010-04-15 16:03:29
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liyong1981

金虫 (正式写手)
★ ★ ★
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1949stone(金币+2): 2010-04-15 18:54
5端的很那做的，帽子很容易降解，你在引物上多下工夫
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2楼2010-04-15 16:10:08
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cqyniu

金虫 (小有名气)
已经用十种引物试了，还是不行，你是用的clotech试剂盒做的吗？还是其他的方法？
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3楼2010-04-15 16:20:53
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liyong1981

金虫 (正式写手)
★ ★
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1949stone(金币+1): 2010-04-15 18:54
我是原始的方法，哈哈，我说了你可以做PCR-WALKING~往5端延伸，5RACE不好做，要有耐心，
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4楼2010-04-15 16:28:33
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won7

金虫 (小有名气)
★
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我也用liyong1981那样的方法，每次可以延伸400bp左右，要耐心哦。
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5楼2010-04-15 17:58:09
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muchongchong838

禁虫 (正式写手)
★ ★ ★
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1949stone(金币+2): 2010-04-15 18:54
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6楼2010-04-15 18:44:41
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yujiaping1

木虫 (著名写手)
★
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你做过巢式PCR了吗？clontech的说明书上有介绍的，巢式的效果相当理想，如果巢式可出带，基本上和目的大小差不多的条带，测序肯定就对了

可以加我QQ124759083，咱们讨论一下
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7楼2010-04-15 21:52:41
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muchongchong838

禁虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
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8楼2010-04-15 22:16:42
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liyong1981

金虫 (正式写手)
不用试剂盒，也可以啊，你设计好引物一样的～祝你成功
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9楼2010-04-16 08:54:43
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