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yaya08

铁杆木虫 (正式写手)

[交流] 【求助】请教:流动相的配制 已有9人参与

这是某篇文献中的流动相:
A液: 缓冲液:甲醇:四氢呋喃=400:95:5(V:V:V)
B液: 缓冲液:甲醇=120:380(V:V)
         缓冲液为20mM醋酸钠溶液(pH=7.2)
梯度洗脱:0-2min, 0%B液              
          2-8min, 0%-15%B液         
          8-18min,15%-70%B液        
          18-25min,70%-100% B液               
          25-30min,70%-100% B液
          30-32min, 100%-0% B液
          32-35min,0% B液
我想请教各位:为什么流动相的配制中水相的缓冲液中会加入甲醇,有机相甲醇中要加入缓冲盐,这样做的根据是什么?(从比例来看,A液主要是缓冲液,承担水相的作用,B液主要是甲醇,承担有机相的作用。)而且很多篇文献中的流动相都是这样设置的,不明白其中的道理是什么。
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xkp123

木虫 (著名写手)

yaya08(金币+4):谢谢交流 2010-04-26 13:40
引用回帖:
Originally posted by 429649057 at 2010-04-15 17:36:53:
如果有机相一组,缓冲盐一组,在进入仪器系统混合时,波动会较大,梯度线不容易平缓的走,甲醇分别加入两相中,起到了缓冲的作用,这样就减弱了梯度线对检测结果的影响。

我不认为是这样的,我们平常都是有机相一组,缓冲溶液一组,混合进样的。因为在进流动相之前已经提供了足够的水环境,不存在基线波动很厉害的问题。我考虑到这样配流动相的目的是考虑到流动相洗脱能力的问题,可能它们混合在一起用洗脱的效果会更好,我指的是以这个比例为基准。呵呵
14楼2010-04-18 16:31:20
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supercat0821

至尊木虫 (职业作家)

yaya08(金币+1):谢谢交流 2010-04-15 18:41
用甲醇的那个是不是因为它的粘度低,而且对于一般的东西都能溶解呢?
2楼2010-04-15 15:24:42
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429649057

木虫 (小有名气)

yaya08(金币+5):谢谢交流 2010-04-15 18:40
如果有机相一组,缓冲盐一组,在进入仪器系统混合时,波动会较大,梯度线不容易平缓的走,甲醇分别加入两相中,起到了缓冲的作用,这样就减弱了梯度线对检测结果的影响。
4楼2010-04-15 17:36:53
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yaya08

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by 429649057 at 2010-04-15 17:36:53:
如果有机相一组,缓冲盐一组,在进入仪器系统混合时,波动会较大,梯度线不容易平缓的走,甲醇分别加入两相中,起到了缓冲的作用,这样就减弱了梯度线对检测结果的影响。

加入甲醇的量有什么依据吗?还是随便加的?
5楼2010-04-15 18:40:41
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