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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 【求助】请教：流动相的配制
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【有奖交流】积极回复本帖子，参与交流，就有机会分得作者 yaya08 的 9 个金币
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yaya08

铁杆木虫 (正式写手)

[交流] 【求助】请教：流动相的配制 已有9人参与

这是某篇文献中的流动相：
A液： 缓冲液：甲醇：四氢呋喃=400：95：5（V:V:V）
B液： 缓冲液：甲醇=120：380（V:V）
         缓冲液为20mM醋酸钠溶液（pH=7.2）
梯度洗脱：0-2min, 0%B液              
          2-8min, 0%-15%B液         
          8-18min,15%-70%B液        
          18-25min,70%-100% B液               
          25-30min,70%-100% B液
          30-32min, 100%-0% B液
          32-35min,0% B液
我想请教各位：为什么流动相的配制中水相的缓冲液中会加入甲醇，有机相甲醇中要加入缓冲盐，这样做的根据是什么？（从比例来看，A液主要是缓冲液，承担水相的作用，B液主要是甲醇，承担有机相的作用。）而且很多篇文献中的流动相都是这样设置的，不明白其中的道理是什么。
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1楼 2010-04-15 14:46:11
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yaya08

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 429649057 at 2010-04-15 17:36:53:
如果有机相一组，缓冲盐一组，在进入仪器系统混合时，波动会较大，梯度线不容易平缓的走，甲醇分别加入两相中，起到了缓冲的作用，这样就减弱了梯度线对检测结果的影响。

加入甲醇的量有什么依据吗？还是随便加的？
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5楼2010-04-15 18:40:41
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supercat0821

至尊木虫 (职业作家)
yaya08(金币+1):谢谢交流 2010-04-15 18:41
用甲醇的那个是不是因为它的粘度低，而且对于一般的东西都能溶解呢？
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2楼2010-04-15 15:24:42
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429649057

木虫 (小有名气)
yaya08(金币+5):谢谢交流 2010-04-15 18:40
如果有机相一组，缓冲盐一组，在进入仪器系统混合时，波动会较大，梯度线不容易平缓的走，甲醇分别加入两相中，起到了缓冲的作用，这样就减弱了梯度线对检测结果的影响。
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4楼2010-04-15 17:36:53
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jsys

荣誉版主 (著名写手)

博洋Lab
yaya08(金币+7):谢谢交流 2010-04-15 21:45
这个方法应该不会是国内的方法，我所接触的国外很多“变态”的分析方法喜欢这样的搞法。其主要的原因是有两种或更多的物质非常难于分离，要靠这样的非常小的比例变化才能搞定，所以要在两相中分别加入差不多相同的东东，通过调节流动相比例来进行分离。而加入的缓冲液就容易理解些了，因为在两种比例的变化的过程中一种物质的比例过大或过小时就会改变流动相的PH值，如果分别在两种物质中加入缓冲液就会把PH值稳定在一个范围内。

[ Last edited by jsys on 2010-4-15 at 20:02 ]
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6楼2010-04-15 20:00:58
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