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yaya08

铁杆木虫 (正式写手)

[交流] 【求助】请教:流动相的配制 已有9人参与

这是某篇文献中的流动相:
A液: 缓冲液:甲醇:四氢呋喃=400:95:5(V:V:V)
B液: 缓冲液:甲醇=120:380(V:V)
         缓冲液为20mM醋酸钠溶液(pH=7.2)
梯度洗脱:0-2min, 0%B液              
          2-8min, 0%-15%B液         
          8-18min,15%-70%B液        
          18-25min,70%-100% B液               
          25-30min,70%-100% B液
          30-32min, 100%-0% B液
          32-35min,0% B液
我想请教各位:为什么流动相的配制中水相的缓冲液中会加入甲醇,有机相甲醇中要加入缓冲盐,这样做的根据是什么?(从比例来看,A液主要是缓冲液,承担水相的作用,B液主要是甲醇,承担有机相的作用。)而且很多篇文献中的流动相都是这样设置的,不明白其中的道理是什么。
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yanan675

银虫 (小有名气)

yaya08(金币+5):谢谢交流 2010-04-17 11:22
一开始莫条件的时候是试等度的,等度不行之后,然后就考虑配一个有机相比例大的和一个有机相比例小的进行梯度洗脱,这种A、B相走起来基线相对比较稳
死机并不可怕,可怕的是没有存档!
13楼2010-04-16 22:46:47
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supercat0821

至尊木虫 (职业作家)

yaya08(金币+1):谢谢交流 2010-04-15 18:41
用甲醇的那个是不是因为它的粘度低,而且对于一般的东西都能溶解呢?
2楼2010-04-15 15:24:42
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429649057

木虫 (小有名气)

yaya08(金币+5):谢谢交流 2010-04-15 18:40
如果有机相一组,缓冲盐一组,在进入仪器系统混合时,波动会较大,梯度线不容易平缓的走,甲醇分别加入两相中,起到了缓冲的作用,这样就减弱了梯度线对检测结果的影响。
4楼2010-04-15 17:36:53
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yaya08

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by 429649057 at 2010-04-15 17:36:53:
如果有机相一组,缓冲盐一组,在进入仪器系统混合时,波动会较大,梯度线不容易平缓的走,甲醇分别加入两相中,起到了缓冲的作用,这样就减弱了梯度线对检测结果的影响。

加入甲醇的量有什么依据吗?还是随便加的?
5楼2010-04-15 18:40:41
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