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houjinglhy

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[交流] 【求助/交流】Real-time PCR 引物如何保证其在整个mRNA pool中的特异性? 已有3人参与

RT,
请问各位是如何设计RT-pcr 引物的。(sybr green)
难道都是先用软件设计好,再BLAST。
如何保证引物在整个mRNA pool中的特异性呢?
有没有好的方法或软件?

[ Last edited by houjinglhy on 2010-4-15 at 07:54 ]
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从小就学习鲁迅,直到现在才体会到他当时是多么的绝望和无助,却仍要用尽最后一丝力气声嘶力竭的呐喊!
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434744419

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
可以先BLAST 后选择特异性好的进行引物设计!尽量避免引物二聚体 !否则有杂峰!
2楼2010-04-15 23:07:01
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yujiaping1

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
老板有钱的话,用探针法,就不愁会有非特异性扩增了
3楼2010-04-16 11:20:56
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刘仕博

金虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
BLAST之后就差不多了吧~
好像也没有别的什么方法。。。
生命在于折腾~
4楼2010-04-16 12:13:11
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