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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】Real-time PCR 引物如何保证其在整个mRNA pool中的特异性？
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houjinglhy

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[交流] 【求助/交流】Real-time PCR 引物如何保证其在整个mRNA pool中的特异性？ 已有3人参与

RT，
请问各位是如何设计RT-pcr 引物的。(sybr green)
难道都是先用软件设计好，再BLAST。
如何保证引物在整个mRNA pool中的特异性呢？
有没有好的方法或软件？

[ Last edited by houjinglhy on 2010-4-15 at 07:54 ]
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从小就学习鲁迅，直到现在才体会到他当时是多么的绝望和无助，却仍要用尽最后一丝力气声嘶力竭的呐喊！
1楼 2010-04-15 07:44:57
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434744419

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
可以先BLAST 后选择特异性好的进行引物设计！尽量避免引物二聚体 ！否则有杂峰！
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2楼2010-04-15 23:07:01
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yujiaping1

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
老板有钱的话，用探针法，就不愁会有非特异性扩增了
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3楼2010-04-16 11:20:56
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刘仕博

金虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
BLAST之后就差不多了吧~
好像也没有别的什么方法。。。
赞一下(1人) 回复此楼
生命在于折腾~
4楼2010-04-16 12:13:11
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