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bettyshan

木虫 (正式写手)

梦幻biobrick

[交流] 【求助/交流】质粒提取 已有10人参与

最近把连接好的载体进行转化后,从抗性平板上挑出阳性菌落进行质粒提取时,效果很不明显,条带非常弱,试剂盒效果也不好。但是我同时提取另一种菌株的质粒,效果就很好。所以排除操作及试剂方面的问题。重复了几次都是如此,不知道是什么问题?请高手指点。
谢谢~~
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我们都是芸芸众生的小人物,相遇相知,都是幸福!
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月月大可

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
表达菌中提取的量少于克隆菌这是正常现象。
7楼2010-04-13 12:47:13
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tingl0087

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
可能你的质粒是严谨型的,拷贝数比较低吧
2楼2010-04-12 22:43:05
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summer0922

铁杆木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
你用的是什么菌株?可能是菌的问题,也有可能是抗生素的问题。
4楼2010-04-13 09:20:32
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Rubisco580

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by tingl0087 at 2010-04-12 22:43:05:
可能你的质粒是严谨型的,拷贝数比较低吧

支持!我也觉得是低拷贝质粒。低拷贝的质粒提取的时候试剂的量是要加大的。我做大抽的时候高低拷贝的质粒,试剂用量差一倍。
5楼2010-04-13 10:34:24
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