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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】质粒提取
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bettyshan

木虫 (正式写手)

梦幻biobrick

[交流] 【求助/交流】质粒提取 已有10人参与

最近把连接好的载体进行转化后，从抗性平板上挑出阳性菌落进行质粒提取时，效果很不明显，条带非常弱，试剂盒效果也不好。但是我同时提取另一种菌株的质粒，效果就很好。所以排除操作及试剂方面的问题。重复了几次都是如此，不知道是什么问题？请高手指点。
谢谢~~
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我们都是芸芸众生的小人物，相遇相知，都是幸福！
1楼 2010-04-12 22:40:03
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tingl0087

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
可能你的质粒是严谨型的，拷贝数比较低吧
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2楼2010-04-12 22:43:05
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scelab

荣誉版主 (文坛精英)

小木虫之有关部门负责人
诡异现象
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小木虫之有关部门负责人
3楼2010-04-12 22:53:12
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summer0922

铁杆木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
你用的是什么菌株？可能是菌的问题，也有可能是抗生素的问题。
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4楼2010-04-13 09:20:32
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Rubisco580

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by tingl0087 at 2010-04-12 22:43:05:
可能你的质粒是严谨型的，拷贝数比较低吧

支持！我也觉得是低拷贝质粒。低拷贝的质粒提取的时候试剂的量是要加大的。我做大抽的时候高低拷贝的质粒，试剂用量差一倍。
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5楼2010-04-13 10:34:24
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塞外雨

金虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
低拷贝质粒，我的也这样
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只想找到关心我、在我犹豫时能给我判断的人
6楼2010-04-13 11:08:37
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月月大可

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
表达菌中提取的量少于克隆菌这是正常现象。
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7楼2010-04-13 12:47:13
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jingcp200320

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
没有必要担心，只要操作正确，一般转化的基本都是目的单克隆。
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8楼2010-04-13 12:59:50
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yayayatou

新虫 (初入文坛)
★ ★ ★
scelab(金币+3):鼓励新虫！欢迎多来交流！:tiger06: 2010-04-13 13:22
可能是低拷贝数吧
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9楼2010-04-13 13:08:09
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雪山飞狐7233

铁杆木虫 (著名写手)

铁杆小虫
换个菌试试！
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梦在路就在！
10楼2010-04-13 13:52:58
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