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汕头大学海洋科学接受调剂
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wsc0451

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】跑DNA琼脂凝胶电泳时有很多小气泡怎么办。。 已有13人参与

由于我PCR扩增后的片段较小,几百bp这样,所用加的琼脂糖量在3%这样,但是这个时候我发现琼脂糖溶液煮沸后,稍微冷却下,其表面还是存在很多小气泡,我倒入电泳槽后往往某块区域是成片的小气泡。想请问各位虫友怎样搞定这些小气泡,不然我的电泳图有明显的白白一块。。。T T
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立意要高,做事要实
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DNAhelix

银虫 (著名写手)

★ ★
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amisking(金币+1): 2010-04-09 17:45
几百bp根本不用3%,1.5%都已经很好了。
倒胶时可以把小气泡赶走。
智慧活法:不生气,不计较!
2楼2010-04-09 16:50:12
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fungixx

至尊木虫 (文坛精英)

优秀版主优秀版主优秀版主

★ ★
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amisking(金币+1): 2010-04-09 17:45
浓度高了确实容易起泡多,尤其是劣质琼脂糖;
你用的浓度确实够高的,用不着那么高,2%的就行;
几年前踏上火车那一刻都还没有意识到,从此故乡只有冬夏,再无春秋
3楼2010-04-09 16:56:27
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zdfang83

木虫 (正式写手)

我煮沸的时候也有好多气泡,可是倒下去后就没有了呢,可能是和浓度有关系吧
4楼2010-04-09 19:34:27
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hxx7867

银虫 (初入文坛)


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如果实在要用那么高浓度的话,卧式制胶的话可以试试趁胶还热的时候,用小药勺之类的东西把起泡赶到边缘后挑起
5楼2010-04-09 19:52:54
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shuwenying

铁虫 (小有名气)

★ ★ ★
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scelab(金币+2):热心虫友,欢迎多来交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2010-04-10 12:08
刚加热完是有小气泡的,稍微静置一下,等气泡都消了,再倒进电泳槽
如果静置到有点凝固了还是有气泡的话,说明你加热的时间不够,没有完全融化。
加热完之后,应当先把瓶子拿起来到视线高度,轻轻摇一下,看看气泡下的液体是不是完全澄清透明了,像水一样是完全澄清的,如果有些折光或者看起来像浆糊一样,就再加热一会。完全融化的话,静置片刻,气泡是会消失的,一定要静置,不要总是拿起来摇晃瓶子就可以了。
6楼2010-04-09 20:06:39
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shuwenying

铁虫 (小有名气)

对了,你的目的条带是多少bp的?真的一定要用3%的琼脂糖电泳?
7楼2010-04-09 20:08:11
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墨香若水

木虫 (著名写手)

小小囧虫


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我200bp的条带1%的胶。  100v 25min
仕不可不弘毅,任重而道远
8楼2010-04-09 20:09:45
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pengl001

木虫 (小有名气)

★ ★
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scelab(金币+1):high hand~ :tiger23: 2010-04-10 12:09
you can use tips to remove the bubble
Yes,Ican!
9楼2010-04-10 01:32:40
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rexue997

银虫 (小有名气)

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scelab(金币+2):谢谢交流!:tiger06: 2010-04-10 12:09
加热时一定要完全融化,就是有大气泡从瓶底冒出来。然后倒胶之前一定要冷却到合适的温度,可以放在冷水里冰浴,而且边冷却边晃动,这时凝胶会冒很多气泡,那就不停的晃动,等到不冒气泡时就行了,从水里拿出来之后还会有一下小气泡,那就静置一下,很快气泡就没了,这时就可以倒胶了
10楼2010-04-10 09:43:07
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