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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】跑DNA琼脂凝胶电泳时有很多小气泡怎么办。。
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wsc0451

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】跑DNA琼脂凝胶电泳时有很多小气泡怎么办。。 已有13人参与

由于我PCR扩增后的片段较小，几百bp这样，所用加的琼脂糖量在3%这样，但是这个时候我发现琼脂糖溶液煮沸后，稍微冷却下，其表面还是存在很多小气泡，我倒入电泳槽后往往某块区域是成片的小气泡。想请问各位虫友怎样搞定这些小气泡，不然我的电泳图有明显的白白一块。。。T T
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立意要高，做事要实
1楼 2010-04-09 15:48:07
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DNAhelix

银虫 (著名写手)
★ ★
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amisking(金币+1): 2010-04-09 17:45
几百bp根本不用3%，1.5%都已经很好了。
倒胶时可以把小气泡赶走。
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智慧活法：不生气，不计较！
2楼2010-04-09 16:50:12
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fungixx

至尊木虫 (文坛精英)

优秀版主优秀版主优秀版主
★ ★
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amisking(金币+1): 2010-04-09 17:45
浓度高了确实容易起泡多，尤其是劣质琼脂糖；
你用的浓度确实够高的，用不着那么高，2%的就行；
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几年前踏上火车那一刻都还没有意识到,从此故乡只有冬夏,再无春秋
3楼2010-04-09 16:56:27
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zdfang83

木虫 (正式写手)
我煮沸的时候也有好多气泡，可是倒下去后就没有了呢，可能是和浓度有关系吧
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4楼2010-04-09 19:34:27
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hxx7867

银虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
如果实在要用那么高浓度的话，卧式制胶的话可以试试趁胶还热的时候，用小药勺之类的东西把起泡赶到边缘后挑起
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5楼2010-04-09 19:52:54
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shuwenying

铁虫 (小有名气)
★ ★ ★
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scelab(金币+2):热心虫友，欢迎多来交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2010-04-10 12:08
刚加热完是有小气泡的，稍微静置一下，等气泡都消了，再倒进电泳槽
如果静置到有点凝固了还是有气泡的话，说明你加热的时间不够，没有完全融化。
加热完之后，应当先把瓶子拿起来到视线高度，轻轻摇一下，看看气泡下的液体是不是完全澄清透明了，像水一样是完全澄清的，如果有些折光或者看起来像浆糊一样，就再加热一会。完全融化的话，静置片刻，气泡是会消失的，一定要静置，不要总是拿起来摇晃瓶子就可以了。
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6楼2010-04-09 20:06:39
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shuwenying

铁虫 (小有名气)
对了，你的目的条带是多少bp的？真的一定要用3%的琼脂糖电泳？
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7楼2010-04-09 20:08:11
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墨香若水

木虫 (著名写手)

小小囧虫
★
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我200bp的条带1%的胶。  100v 25min
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仕不可不弘毅，任重而道远
8楼2010-04-09 20:09:45
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pengl001

木虫 (小有名气)
★ ★
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scelab(金币+1):high hand~ :tiger23: 2010-04-10 12:09
you can use tips to remove the bubble
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Yes,Ican!
9楼2010-04-10 01:32:40
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rexue997

银虫 (小有名气)
★ ★ ★
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scelab(金币+2):谢谢交流！:tiger06: 2010-04-10 12:09
加热时一定要完全融化，就是有大气泡从瓶底冒出来。然后倒胶之前一定要冷却到合适的温度，可以放在冷水里冰浴，而且边冷却边晃动，这时凝胶会冒很多气泡，那就不停的晃动，等到不冒气泡时就行了，从水里拿出来之后还会有一下小气泡，那就静置一下，很快气泡就没了，这时就可以倒胶了
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10楼2010-04-10 09:43:07
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