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Tina2009

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】产纤维素酶菌株筛选的培养基问题 已有5人参与

各位虫友,大家好!我现在在做产纤维素酶菌株的筛选,看文献的时候,他们用的产酶培养基和初筛培养基都不一样,而我用的是一样的,都是加了CMC的培养基,我想请问下:1,俩培养基一样有没有什么影响啊?因为目前我还不知道我筛的那菌的培养基配方。2,正交实验优化培养基配方和优化培养条件,先优化那个好啊?谢谢呵呵。
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

★ ★ ★ ★ ★
amisking(金币+5): 2010-04-08 12:41
Tina2009(金币+2):解说得非常详细,谢谢哈! 2010-04-08 21:16
初筛和复筛培养基是不是一样不要紧,因为没有任何证据直接表明哪些成分更加能帮助筛选出目的菌株的,而且还可以优化培养基。理论上如此,但对于纤维素酶来说就不一定了。

因为所要筛选的微生物种类非常多,多得根本不知道有多少种,所以只能广泛参考众多文献来推断哪些成分更加能够帮助自己筛选的目的菌株,对于降解纤维素来说,培养基里有了唯一碳源就能够筛选得到降解纤维素的菌株了,作为初筛培养基就足够了。

复筛培养基再加点大众碳氮源来使得菌株生长得更好,更容易测到纤维素酶活力,使各菌株酶活力水平都提高一个档次。因为纤维素酶的问题就是稍不注意,液体培养就测不到酶活力。所以说初筛培养基只要有纤维素就行,但复筛培养基建议适当加入营养物质。

至于优化培养基,建议考虑一下响应面。至于哪种因素更影响产酶,我觉得是培养温度和起始pH,起码在我的实验里是这样。如果是固体培养,就是起始pH和含水量。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
4楼2010-04-08 12:17:58
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with_nothing

金虫 (正式写手)

★ ★
amisking(金币+2): 2010-04-08 12:41
Tina2009(金币+2):谢谢交流! 2010-04-08 21:15
筛菌是为了要菌体, 产酶是为了要产物。两个培养基应该是不太一样的。不过你还没做过优化应该没什么事吧。刚开始可以参考文献报道的
先通过文献了解下他的基本情况吧。一般都是先做培养基优化,再做条件优化的。正交实验也可以在做完初步的单因素后,把培养基成分和条件放在一块设计的
江水
3楼2010-04-08 12:12:45
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千与千寻小寻

铜虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★ ★
Tina2009(金币+1):谢谢参与~~ 2010-04-08 21:16
scelab(金币+5):鼓励新虫!欢迎多来交流!:tiger06: 2010-04-08 23:30
筛选用纤维素刚果红培养基,,正在学习中
学想要学的,做要想做的,GO!
5楼2010-04-08 20:45:38
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Tina2009

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by with_nothing at 2010-04-08 12:12:45:
筛菌是为了要菌体, 产酶是为了要产物。两个培养基应该是不太一样的。不过你还没做过优化应该没什么事吧。刚开始可以参考文献报道的
先通过文献了解下他的基本情况吧。一般都是先做培养基优化,再做条件优化的。 ...

请问下,如果先做条件优化后座培养基优化,会不会有什么问题呢?谢谢了~~
6楼2010-04-08 21:20:25
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