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qingcha

金虫 (著名写手)

[资源] 【资源】应对毛细管电泳重现性不好的方法

做毛细管电泳的人都会有这样的体会，电泳的重现性非常不好，这次衍生进样和下次同样条件衍生的出峰时间不同，或者换根柱子就又全变了。那么怎么应对呢？通过和师哥师姐交流以及自身体会，认为：
一、对于柱前衍生而言，摸好衍生条件后，一次性多衍生，足够做完本次实验的。如果不够，下次你还是按相同条件衍生，可能出峰又不同。
二、柱子活化好以后抓紧做，争取不堵柱子，利用一根柱子做完本次实验。
三、实验的缓冲液多配点，也是够做完本次实验的。因为你就是配相同缓冲液的时候会有误差，也会有影响。
总的来说，就是衍生、缓冲液要多量，够做完本组实验。
个人的一点经验，希望会对大家有帮助。
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1楼 2010-04-07 21:27:02
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yensh

金虫 (文坛精英)

★★★★★ 五星级,优秀推荐

赞同但不赞许~~~

自己都不能重复的其他读者如何重复你的实验结果？
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2楼2010-04-08 07:29:50
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qingcha

金虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by yensh at 2010-04-08 07:29:50:
赞同但不赞许~~~

自己都不能重复的其他读者如何重复你的实验结果？

毛细管电泳的重现性本来就不是很好，但也不是一点都不好。你这次的pH在9.5，换柱子后可能不是9.5了，但还是在9.5的附近徘徊，不是一下子就完全改变，这也是不可能的。这种方法只是希望给做电泳的朋友一点建议，更快的做出实验。O(∩_∩)O~
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3楼2010-04-08 08:18:36
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qingcha

金虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by qingcha at 2010-04-07 21:27:02:
做毛细管电泳的人都会有这样的体会，电泳的重现性非常不好，这次衍生进样和下次同样条件衍生的出峰时间不同，或者换根柱子就又全变了。那么怎么应对呢？通过和师哥师姐交流以及自身体会，认为：
一、对于柱前衍生 ...

重现性也和所选用的柱子有关系，国内的柱子就没有国外的柱子重现性好，呵呵
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4楼2010-04-08 08:20:45
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hezhao999

木虫 (正式写手)

★★★ 三星级,支持鼓励

毛细管重现性确实不好。
另外最好使用内标。。。。
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5楼2010-04-08 09:19:10
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platto

木虫 (著名写手)

★★★★★ 五星级,优秀推荐

★ ★ ★
佳怡(金币+3):感谢参与 2010-04-08 19:38
毛细管内壁的硅羟基解离存在pH突越的，而每个实验室的pH计不见得稳定性很好，所以虽然pH计上读数一样，但真正的pH却有可能有差别，这些微小的差别在CE中可能会引起比较大的波动。
另外，毛细管内别的硅羟基种类很多，而且分布不均匀，这也导致了毛细管和毛细管间的分离性能差异。
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6楼2010-04-08 11:38:55
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qingcha

金虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by platto at 2010-04-08 11:38:55:
毛细管内壁的硅羟基解离存在pH突越的，而每个实验室的pH计不见得稳定性很好，所以虽然pH计上读数一样，但真正的pH却有可能有差别，这些微小的差别在CE中可能会引起比较大的波动。
另外，毛细管内别的硅羟基种类很 ...

有道理……
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7楼2010-04-08 13:32:14
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qdiocas

银虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by qingcha at 2010-04-07 21:27:02:
做毛细管电泳的人都会有这样的体会，电泳的重现性非常不好，这次衍生进样和下次同样条件衍生的出峰时间不同，或者换根柱子就又全变了。那么怎么应对呢？通过和师哥师姐交流以及自身体会，认为：
一、对于柱前衍生 ...

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很好的经验积累。这同时是Beckman毛细管电泳的致命伤。如果可能，陪台加拿大的iCE，毛细管柱是透明的，峰分离后，检测器通过柱壁直接成像。
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8楼2010-04-09 16:56:34
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qingcha

金虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by qdiocas at 2010-04-09 16:56:34:


-----------------------------------

很好的经验积累。这同时是Beckman毛细管电泳的致命伤。如果可能，陪台加拿大的iCE，毛细管柱是透明的，峰分离后，检测器通过柱壁直接成像。

通过柱壁直接成像是什么意思啊老兄?有什么优点捏？
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9楼2010-04-09 20:39:49
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柳成阴

版主 (文坛精英)

★ 一星级,一般

电泳的重现性基本无解
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10楼2010-04-09 20:46:41
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糊涂小小

银虫 (小有名气)

★★★★★ 五星级,优秀推荐

貌似有用，我会去试下
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11楼2010-04-09 21:09:51
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