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441273385

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】DNA 电泳图谱 求解 已有5人参与

这是从人胰腺癌细胞中提取的DNA 做的电泳图
上样量:15ul , 1%的琼脂糖凝胶电泳,100V恒压 1h, EB染色30min    从左到右依次为:marker,空白,低浓度.....高浓度,marker
请问下这么多拖尾是咋回事,DNA梯度电泳咋没有呢?也做了上样量是5,10,20ul的 图也差不多一个样子                                                   


[ Last edited by 441273385 on 2010-4-7 at 10:54 ]
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

引用回帖:
Originally posted by 441273385 at 2010-04-07 12:44:11:

谢谢   caspase-3,Hoechst,western,都出结果了 就DNA ladder 不好 老板说还需要这个结果 哎

ladder只有在特定阶段才会出现,早了过了都很难做出来
我记得有份优化的ladder抽提方法
或者你买个试剂盒抽一下,专门抽ladder的,听说北京普利莱公司有,特异去除gDNA大片段只收集短片段的
13楼2010-04-07 12:52:45
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yujiaping1

木虫 (著名写手)


441273385(金币+1): 2010-04-07 11:06
1949stone(金币+1): 2010-04-07 13:22
新鲜组织有的时候是这个样子的,有时是RNA的原因,可以用RNA酶消化一下看看效果,其实冰箱里放一段时间再捡测可能就好了,我觉得DNA质量还可以,但是浓度不高,15ul点样量,我上DNA都是2ul
2楼2010-04-07 11:03:17
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441273385

木虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by yujiaping1 at 2010-04-07 11:03:17:
新鲜组织有的时候是这个样子的,有时是RNA的原因,可以用RNA酶消化一下看看效果,其实冰箱里放一段时间再捡测可能就好了,我觉得DNA质量还可以,但是浓度不高,15ul点样量,我上DNA都是2ul

请问我看有的DNA 电泳加药高浓度时都明显的梯度出现 我的为啥没有呢 您说的质量还可以是指哪方面呢 您上样上2ul染色后颜色能看清楚么 谢谢啦
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3楼2010-04-07 11:06:23
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leon198418029

金虫 (小有名气)

research associate

引用回帖:
Originally posted by 441273385 at 2010-04-07 10:50:40:
这是从人胰腺癌细胞中提取的DNA 做的电泳图
上样量:15ul , 1%的琼脂糖凝胶电泳,100V恒压 1h, EB染色30min    从左到右依次为:marker,空白,低浓度.....高浓度,marker
请问下这么多拖尾是咋回事,DNA梯度 ...

空白泳道有了拖尾,看来是被污染了。在加样孔附近,七条泳道都有一条亮带,是不是预期大小的DNA片段?至于拖尾,可能是提取DNA的时候,DNA被破碎, 一些细小的DNA碎片的造成的,建议优化提取方法。
不忘初心,为梦远行。
4楼2010-04-07 11:08:19
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