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谁知道

铁虫 (小有名气)

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[交流] 【求助/交流】为什么跑出的RNA电泳图只有一条带，而且很亮？已有9人参与

我用trizo法提取的细菌RNA，分光光度计检测其浓度为100ng/微升，260/280为1.9 ， 260/230为2.25l ，可为什么跑出的RNA电泳图只有一条带，而且很亮呢？

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每个人一辈子从来都是一个人

1楼 2010-04-06 22:09:25

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wangqk198738

金虫 (正式写手)

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对，但是也错

引用回帖:

Originally posted by DNAhelix at 2010-04-07 12:19:22:

一般到逆转才用到引物，那么它的产物是cDNA.
并非在RNA阶段！
退一步来说，即使他提取的是单一的mRNA,也不可能跑出一条亮带！

对于cDNA克隆来讲：要是很纯的模板，条带是单一的，要是有两条带就只能说明有较多的杂质。不信你下次做实验掺杂一点试试看。
要是一种细胞或组织的总mRNA，你用来检测目的就是想知道有没有，条带也是单一的，这跟你制胶有关。你用大孔的，自然跑的时候速率差不多一样快，怎么区分，所以说我们不用来区分它们，我们只要知道有没有就行了。要是还有一条微微的带，那不要紧，肯定有小分子的RNA了，你分析的时候说明就是了。整个楼层就是我跟楼主讨论了。不过楼主打破沙锅问到底的精神很好啊。我还是那句话，拿到以前的老文章，肯定会有相关知识，现在的文章都不提了，因为这是很间的事情大家都不在乎。但也要有证据证明你的RNA存在。