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谁知道

铁虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】为什么跑出的RNA电泳图只有一条带,而且很亮?已有9人参与

我用trizo法提取的细菌RNA,分光光度计检测其浓度为100ng/微升,260/280为1.9 , 260/230为2.25l ,可为什么跑出的RNA电泳图只有一条带,而且很亮呢?
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wangqk198738

金虫 (正式写手)

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scelab(金币+5):high hand~ :tiger23: 2010-04-07 12:40
引用回帖:
Originally posted by DNAhelix at 2010-04-07 10:57:33:


楼主你弄混了吧,不是指总的mRNA,意思是总mRNA跑胶,你说会有一条带出现,既然出现某条带,一般是针对某个基因而已,顶多掺杂难以分辨的核苷酸数接近的基因,所以我前面问是什么基因的条带?!如果总mRNA有条 ...

我真是让你的问题搞得一头雾水。你是说一种mRNA的总量。还是说一个细胞里的总mRNA量(不一定是一种而是多种)那要找你的意思说就得赖你了,你要是连自己想克隆什么片段都不知道,怎么设计的引物啊?要是说提取总RNA我们检测就看它有没有RNA即可。我说的两条带是检测的结果,mRNA和t,rRNA分成两队。这回明白了吧!这种情况出现一条带说明你跑的不好。要是单纯的mRNA那肯定是一条带了。这回明白了吧!祝好——共勉。
14楼2010-04-07 12:05:57
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DNAhelix

银虫 (著名写手)

★ ★
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1949stone(金币+1): 2010-04-07 08:12
当时提取真核细胞RNA时,有三条带,28s/18s约为2:1.
原核也应该有三条带吧。

是不是没提取好?那一条亮带大概在什么位置?如果在加样孔旁会不会是蛋白污染?
智慧活法:不生气,不计较!
2楼2010-04-06 22:42:26
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
无图无真相~~~
跟marker比大概是哪个位置?
3楼2010-04-06 23:29:30
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wangqk198738

金虫 (正式写手)

图片呢?

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1949stone(金币+2): 2010-04-07 08:13
晕,没有图片大家怎么帮你分析。把图片传上来吧。我做的一般是两条带,因为mRNA和另外两个RNA的碱基数相差很大,所以会分成两条带,要是跑胶的时间长,胶制作的密一点,应该会跑出三条带。你下次跑的时间长点。同时也跟提取方法有关,要是你的方法只是提取mRNA 那就只能跑出一条带了。对伐!
4楼2010-04-06 23:54:27
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