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【求助/交流】关于PCR产物作为模板再进行PCR的问题,求助
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wwsw38
铁虫
(小有名气)
应助: 0
(幼儿园)
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帖子: 85
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虫号: 943642
注册: 2010-01-16
性别: GG
专业: 微生物生理与生物化学
[交流]
【求助/交流】关于PCR产物作为模板再进行PCR的问题,求助
已有7人参与
我好不容易才P出来的一种16SRDNA,但别人说杂质过多不好测序.请问有谁知道PCR产物能不能直接作为模板进行扩增?如果能的话取一微升产物到50微升的体系中进行扩增会不会太多了?
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为自己加油
1楼
2010-04-06 21:18:00
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zdfang83
木虫
(正式写手)
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(幼儿园)
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散金: 120
红花: 4
帖子: 991
在线: 213.6小时
虫号: 450945
注册: 2007-11-04
性别: GG
专业: 食品科学基础
★
小木虫(金币
+0.5
):给个红包,谢谢回帖交流
我的测序结果说出现双峰,可能是非单克隆引起的
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7楼
2010-04-08 11:14:28
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zzw1221
木虫
(著名写手)
应助: 1
(幼儿园)
金币: 3864.2
散金: 106
红花: 3
帖子: 1488
在线: 219.9小时
虫号: 611599
注册: 2008-09-24
性别: GG
专业: 作物分子育种
★
amisking(金币+1): 2010-04-06 21:52
你电泳的时候胶浓度稍大点,跑的时间长点,使条带尽量分开,找到你的目的条带切胶纯化测序。
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2楼
2010-04-06 21:38:38
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lyg7720349
铜虫
(小有名气)
应助: 0
(幼儿园)
金币: 75.2
帖子: 145
在线: 9小时
虫号: 941449
注册: 2010-01-12
性别: GG
专业: 生物大分子结构与功能
★
小木虫(金币
+0.5
):给个红包,谢谢回帖交流
可以的,有杂质的情况下也没问题,只要你确定P的时候只要对引物没应影响就行了,我同学刚做了你说的。
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望大家都各有所获!
3楼
2010-04-06 21:47:23
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wenzhenice
木虫
(正式写手)
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(幼儿园)
金币: 10265.8
帖子: 376
在线: 47.7小时
虫号: 427924
注册: 2007-07-30
专业: 计算机软件
★
小木虫(金币
+0.5
):给个红包,谢谢回帖交流
its better to dilute the PCR product 10 times or 100times,then use it as template
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4楼
2010-04-07 04:28:18
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