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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 【求助】关于葡萄糖标准曲线的制备
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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xiongzai08

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助】关于葡萄糖标准曲线的制备 已有5人参与

我最近在用做葡萄糖的标准曲线，已经做了三遍了，硬是没做出来，我的方法是：配好0.5mg/ml的葡萄糖标准溶液，分别取20μl、40μl、80μl、120μl、160μl、200μl于10ml的容量瓶中，加入5%苯酚溶液1ml，混匀，迅速加浓硫酸7ml，摇匀，定容，置于40度的水浴中保温30分钟，去除后置于冰水浴中5分钟。经过紫外扫描后，发现对照品中前三个的吸收值是负值，我是用了空白建立基线的，不知道为什么。还有就是所有对照品加浓硫酸时会很烫，不知道对检查有没有影响，当加完硫酸后用水定容时溶液的颜色都会从绿色变为黑色，发热同样很严重，我个人认为这个地方出了问题，请各位做了葡萄糖标准曲线的高手给个合理的解释，小弟感激不尽。
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1楼 2010-04-06 19:53:52
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ditiandi

铜虫 (初入文坛)

注意的小问题

★
karl2100(金币+1):谢谢指教！ 2010-04-07 00:00
xiongzai08(金币+3): 2010-04-07 09:26
第一：你先可以定容，因为后面的加苯酚和浓硫酸是一定的。最好不要用你反应的仪器的刻度来定容。
第二：反应仪器一定要洗干净，最好用酸洗液洗过，不知你用塞子不？如用就不要塑料棉塞等跟浓硫酸有反应的产生碳化的。
第三：关于加浓硫酸产热是很正常的，但你可以在加入后放在冰水浴中以减小其误差。
这是我最近做的时候得到的几点，希望你对你有帮助。而且反应后的颜色不是黑色的。
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2楼2010-04-06 21:54:56
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chenjiajiang198

至尊木虫 (著名写手)
迅速加浓硫酸7ml？？？？？
朋友 不应该是迅速哈 应该是在冰水浴中边摇边滴加硫酸 不然会使糖类成分糊化
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3楼2010-04-06 22:49:44
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xiongzai08

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by ditiandi at 2010-04-06 21:54:56:
第一：你先可以定容，因为后面的加苯酚和浓硫酸是一定的。最好不要用你反应的仪器的刻度来定容。
第二：反应仪器一定要洗干净，最好用酸洗液洗过，不知你用塞子不？如用就不要塑料棉塞等跟浓硫酸有反应的产生碳化 ...

朋友，我对你的回答中的第一点很感兴趣，我的对照品加完苯酚和硫酸之后是绿色的（我感觉是，可能因人而异吧），等我加水定容至刻度时，摇匀发现颜色就会变黑，散热很大，是不是因为碳化的原因呢呢？
还有一点，你说让我先定容再加苯酚和硫酸，那溶度岂不是变小了，做标曲的时候拿怎么办啊？
谢谢
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4楼2010-04-07 09:25:57
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ddw888

金虫 (小有名气)
好好检查一下你的苯酚试液
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5楼2010-04-08 17:40:32
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ddw888

金虫 (小有名气)
建议新买苯酚固体，然后临用新制
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6楼2010-04-08 17:41:57
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weiyuanchen2003

木虫 (小有名气)
首先，要用玻璃器皿，所有玻璃器皿都要经稀酸液浸泡并清洗干净并烘干；
其次，要用移液管取样，不要用移液枪，以保证准确；
再次，苯酚固体要先重蒸，配成80%溶液，现用时再稀释成相应浓度；
最后，浓硫酸最好用新的，都取自同一瓶。
浓硫酸就是要迅速加入，并摇匀。
我实验时，用的是1ml样品，1ml苯酚（6%体积比），1ml水，5ml浓硫酸。
希望对你有所帮助！祝你成功！
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7楼2010-04-08 18:51:04
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