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wuqiang186

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】【求助】多肽跑电泳问题 已有5人参与

各位大虾请教一下,分子量5000左右的多肽跑SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,一般用多大浓度分离胶,浓缩胶多大浓度?标样一般用哪些?希望好心人多多指教,谢谢~
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ln0401

新虫 (初入文坛)


1949stone(金币+1): 2010-04-06 13:02
wuqiang186(金币+1): 2010-04-06 13:41
分离胶12%,浓缩胶通用,marker用14-97kDa的就可以了
2楼2010-04-06 11:56:48
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silicare

荣誉版主 (文坛精英)

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优秀版主


1949stone(金币+1): 2010-04-06 13:02
wuqiang186(金币+1): 2010-04-06 13:41
主要看marker,超低分子量的
3楼2010-04-06 12:01:16
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mql1986

木虫 (小有名气)


wuqiang186(金币+1): 2010-04-06 13:41
scelab(金币+1):谢谢交流!:tiger06::tiger28: 2010-04-06 13:47
本人做过一个7k的sds-page,但是条带始终在14k左右,这个可以理解为正常。我开始用的Tris系统专门跑小蛋白的,发现效果一般,后来改成15%的胶,发现也是平常,最后怒了,直接上12%的胶,效果不错。我的意思是直接12%就行,但是要掌握好电压和时间。
4楼2010-04-06 13:29:09
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wuqiang186

金虫 (小有名气)

跑5000分子量多肽,12%分离胶是不是貌似有些大了?
5楼2010-04-06 13:29:17
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mql1986

木虫 (小有名气)

wuqiang186(金币+1): 2010-04-06 13:40
本人做过一个7k的sds-page,但是条带始终在14k左右,这个可以理解为正常。我开始用的Tris系统专门跑小蛋白的,发现效果一般,后来改成15%的胶,发现也是平常,最后怒了,直接上12%的胶,效果不错。我的意思是直接12%就行,但是要掌握好电压和时间。
6楼2010-04-06 13:29:26
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wuqiang186

金虫 (小有名气)


你的12%分离胶分离效果怎样,特别是一些小分子肽,甚至小于5K的?你的电流和电压控制怎样,能详细说明一下吗?谢谢~
7楼2010-04-06 13:40:36
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wordsworth3180

木虫 (正式写手)


scelab(金币+1):欢迎常来交流~~~:tiger06: 2010-04-06 16:25
wuqiang186(金币+1): 2010-04-06 18:45
我觉得还是Tricine跑得效果好,用那种最小分子量2kD的Marker.
8楼2010-04-06 16:21:19
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wuqiang186

金虫 (小有名气)

大家能不能再给些建议呢。。。
9楼2010-04-07 10:21:45
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