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mlcrazy9596

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】求助 PCR空白总是有条带 已有11人参与



想鉴定细菌的种类,用16s的通用引物去PCR,但是空白的总是有条带!用的是天根的mix,刚拆的,引物是别人的,一直用没问题!不知道怎么回事!!
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yujiaping1

木虫 (著名写手)


scelab(金币+1):谢谢交流!:tiger06: 2010-04-05 22:42
估计天根的酶应该是不会有问题,在超净工作台加样,枪头、管都灭菌处理好,我感觉还是操作的问题。
引物污染的可能性也比较大,别人用的没问题,但你用来稀释的水有没有问题

[ Last edited by yujiaping1 on 2010-4-5 at 22:30 ]
4楼2010-04-05 22:29:19
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yujiaping1

木虫 (著名写手)

★ ★
mlcrazy9596(金币+1):谢谢参与
scelab(金币+1):谢谢交流!:tiger06: 2010-04-05 19:23
你的水呢,是天根配的水吗?16s是很容易污染的,如果楼主是测序,按图上的情况影响不大,估计测序不会有问题,但是楼主最好不要只测一个菌,测两三个,结果一致就能保证准确了,怕只测一个,真的是来自污染菌的16s
2楼2010-04-05 19:08:44
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mlcrazy9596

金虫 (小有名气)

scelab:全套换掉~ 2010-04-05 21:53
我就是用来菌种鉴定的啊 !!!哎。。。。用的也是天根自带的双蒸水。
3楼2010-04-05 19:54:51
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csjiang1123

木虫 (小有名气)

★ ★
mlcrazy9596(金币+1):谢谢参与
scelab(金币+1):谢谢交流!:tiger06: 2010-04-05 22:42
我估计也是引物的问题,引物是容易污染的,我也遇到了同样的问题,逐个条件排除就是引物问题。
5楼2010-04-05 22:38:06
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